郭 捷，谢芝勋，彭 宜，刘加波，谢志勤，庞耀珊，邓显文，谢丽基

（1.广西大学动物科学技术学院，广西南宁530004；2.广西壮族自治区兽医研究所 广西畜禽疫苗新技术重点实验室，广西南宁530001）

禽流感（Avian influenza，AI）是由正黏病毒科（Orthomyxoviridae）A型流感病毒属中不同亚型病毒引起的禽类感染和疾病的总称。禽流感病毒（AIV）为单股负链RNA病毒，由8个独立的RNA节段组成，根据其表面血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的抗原性差异，可分为16个HA亚型和9个NA亚型。其中H1和H3亚型AIV虽然属于低致病性AIV，在禽类中没有表现出明显症状，较少出现死亡，但在人类流感中H1和H3亚型流感病毒引起过世界性的大流行［2］，20世纪全球发生过3次流感大流行都是由H1亚型或H3亚型流感病毒造成的，尚且不能证明这几次大流行流感的2种亚型病毒来自于禽类，但可以推断禽源H1和H3亚型AIV为人类流感病毒提供了基因片段，从而间接的威胁着人类的身体健康，具有重要的公共卫生意义［3-7］。所以，建立同时快速检测H1和H3亚型AIV的方法，对这两种亚型禽流感病毒感染的诊断和控制非常关键。

目前对H1和H3亚型AIV感染的鉴别诊断主要依靠传统的病原分离鉴定与血清学试验，这些方法有一定的局限性，不能同时检测出这两种亚型AIV。因此，本研究选择一种具有敏感性高、特异性好、快速、简便的PCR检测方法用于鉴别诊断H1和H3亚型禽流感病毒感染。相对于单项PCR技术，二重PCR技术能同时检测并鉴别出两种病原体，在临床上具有很高的应用价值。此方法已被广泛应用于一些病原微生物的检测中，并且具有良好的敏感性和特异性［8-12］。……