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携带PCV-2ORF2的感染性PRRSV克隆在Marc-145细胞表达的研究

2012-08-14郑海红张可煜袁世山

动物医学进展 2012年12期

郑海红,张可煜,周 艳,袁世山*

(1.中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病研究室,上海200232;2.中国农业科学院上海兽医研究所动物药学研究室,上海200232)

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是动脉炎病毒科(Arteriviridae)成员之一[1]。该病毒主要引起母猪流产、死胎、产弱仔、木乃伊胎等繁殖障碍以及仔猪与育肥猪的呼吸道疾病。猪体一旦感染了该病毒,往往为其他病毒侵入机体打开了通道,引发混合感染并进而造成更为严重的疾病甚至死亡[2-3]。猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的流行给中国乃至世界养猪业都带来巨大经济损失。

为研制能防控PRRS的标识弱毒苗以及防控PRRS与其他病毒病的二联苗或多价苗,众多学者都试图把PRRSV作为稳定表达外源基因的载体。然而,多年来的研究表明,利用PRRSV作为载体表达外源基因,外源序列常常被逐步删除[4-5],且这种删除现象在动脉炎病毒具有共性。有报道提出动脉炎病毒删除外源序列可能与外源序列的插入导致所插入位置及转录调控序列(transcription regulation sequence,TRS)的二级结构改变有关,同时还可能与外源序列的长度及其自身特性相关[6-10]。然而,更为详尽的机制却尚未阐明,因而无法在实践中指导构建能稳定表达外源序列的动脉炎重组病毒。

就PRRSV而言,若直接在基因组上插入外源序列而不对PRRSV基因组进行改造,外源序列常常缺失[4-5];而若能对PRRSV基因组进行恰当的缺失/插入TRS等改造,则插入的外源序列则往往具有遗传稳定性[11-12]。据此,本研究借助前期构建的感染……

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