李贞娟，张彩凤，韩 宇，文廷玉，董良鹏，张秀英

(新乡医学院第一附属医院，河南卫辉453100)

溃疡性结肠炎(UC)是一种发生于结直肠的慢性非特异性炎症性疾病，其病因可能与遗传易感人群在多因素作用下所引起的肠道黏膜免疫系统异常反应相关［1］。IL-10作为炎症抑制因子，能够抑制UC患者中Th1型细胞因子的分泌，在其发生发展过程中起重要作用。IL-10分泌量主要由遗传决定，而且主要受转录水平控制。研究表明，IL-10基因启动子区域主要有3个单核苷酸多态性(SNPs):IL-10－592(C→A)、IL-10－819(C→T)、IL-10－1082(G→A)，IL-10启动子区多态性位点与其在血清中的蛋白表达关系密切。本研究就IL-10启动子区IL-10－1082/－819/－592位点SNPs及其在 UC患者血清中表达的相关性进行探讨，为UC分子及基因水平的诊断、治疗、预后评估及相关研究奠定实验基础。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2008年5月～2010年8月于我院就诊的门诊及住院UC患者60例(UC组)，均符合全国炎症性肠病诊疗规范共识意见［2］。其中轻度24例、中—重度36例;年龄(43.30±11.60)岁。对照组40例，男22例、女18例，年龄(40.21±10.32)岁，均系我院健康体检者，均无血缘关系。两组年龄及性别均衡可比。

1.2 方法

1.2.1 血清IL-10的检测 应用ELISA法测定IL-10。患者于清晨空腹采肘静脉血3 mL，离心取血清，置－20℃保存待测。

1.2.2 IL-10基因型检测 采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性法检测IL-10－592A/C、IL-10－1082 A/G基因型。收集UC组及对照组外周静脉血5 mL，应用EDTA-K2抗凝，加入红细胞裂解液裂解红细胞，离心去上清，重悬白细胞，再加入白细胞裂解液裂解白细胞，按照常规酚:氯仿:异戊醇抽提法提取基因组DNA，并用2%琼脂糖凝胶电泳检测后－80℃储存备用。……