宋慧琴，李道明

(1河南大学第一附属医院，河南开封475000;2郑州大学第一附属医院)

己酮可可碱(PTX)为磷酸二酯酶抑制剂，能增加细胞内cAMP，并有改善血流动力学、免疫抑制和抗纤维化的作用。其可以抑制IκBα的磷酸化及降解，抑制NF-κB的活性。PTX在肿瘤治疗中的作用已引起人们的广泛关注，如PTX可去除化疗药物引起的细胞周期阻滞，增强顺铂、苯丙氨酸氮芥和柔红霉素等化疗药物的细胞毒性，激活凋亡信号途径，导致肿瘤细胞死亡［1］。5-氟尿嘧啶(5-Fu)作为胸苷酸合成酶抑制剂，是被广泛应用的化疗药物，当5-Fu进入体内，即转变为5-氟尿嘧啶脱氧核苷酸，抑制脱氧胸苷酸合成酶，影响DNA合成［2］。2007年6月～2008年6月，本研究探讨了5-Fu和PTX联合5-Fu对EC9706细胞的抑制作用，为寻找治疗食管癌的新方法提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料 人食管癌细胞株EC9706由中国医学科学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室惠赠。PTX由河南康诺医药公司惠赠，5-Fu购自上海旭东海普药业公司，四甲基偶氮唑蓝(MTT)购自美国Sigma公司。

1.2 方法

1.2.1 分组 对照组，不加药物，作为各处理组各剂量水平的共同对照;PTX处理组，设置0.01 mg/mL、0.10 mg/mL、0.50 mg/mL、1.00 mg/mL 4 个剂量水平;5-Fu处理组，设置25μg/mL、50μg/mL 2个剂量水平;PTX联合5-Fu处理组，设置8个剂量水平。见表1。

表1 PTX联合5-Fu用药浓度分组

1.2.2 MTT方法检测细胞生长情况 将1×105/mL EC9706细胞悬液接种于96孔培养板中，200 μL/孔，置37℃、5%CO2饱和湿度培养箱中。培养24 h后按分组加药，每组设6个复孔，继续培养12、24、48、72 h，每孔加入 20 μL/孔 MTT(5 mg/mL)继续培养4 h，吸去每孔液体，加入 DMSO 150μL/孔，振荡溶解15 min，以空白对照调零，用自动酶标仪在490 nm波长处测出各实验组的OD值。……