4种中药多糖及胸腺肽对U14宫颈癌荷瘤鼠脾脏和瘤内免疫影响的比较*
2012-08-02罗惠娟徐建平谢杏美陈瑞平
罗惠娟,徐建平,黎 清,谢杏美,陈瑞平
(暨南大学第一附属医院妇产科,广东 广州 510632)
宫颈癌是危害妇女健康的主要恶性肿瘤之一,由于机体免疫力低下患者往往死于严重感染,肿瘤扩散、复发等并发症,因此免疫增强剂已经成为重要的辅助治疗手段。本研究通过比较枸杞、当归、人参、灵芝4种常用的中药多糖和核酸类免疫增强剂:胸腺肽(thymopeptide,THY)对U14宫颈癌荷瘤鼠肿瘤生长、瘤组织内部和脾脏免疫的影响,试图找到对宫颈癌有相对特异性的免疫增强剂,达到提高患者生存率的目的。
材料和方法
1 材料
昆明小鼠,SPF级,6~8周龄,体重(20±2)g,雌性,广州中医药大学动物中心提供,动物质量合格证号:SCXK(粤)2008-0020;U14宫颈癌腹水型细胞株由中国医学科学院中心细胞库提供;枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharide,LBP)、当归多糖(Angelica sinensis polysaccharide,ASP)、灵芝多糖(Ganodema lucidum polysaccharide,GLP)和人参多糖(Panax ginseng polysaccharide,PGP)由陕西锦泰生物工程有限公司提供;胸腺肽肠溶片由西安迪赛生物药业生产,批号为0810555,每片5 mg;免疫荧光抗体:FITC anti-mouse CD3、PerCP anti- mouse CD4、APC anti- mouse CD8a、PE antimouse CD49 b和小鼠脾淋巴细胞分离液购于北京达科为生物技术有限公司。免疫组化抗体:兔抗人/鼠干扰素γ(interferon γ,IFN-γ)购于巴傲得生物科技有限公司;兔抗人/鼠白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)购于武汉博士德生物有限公司;生物素化山羊抗兔IgG抗体-HRP多聚体,购于北京中杉金桥生物技术有限公司。
2 实验分组
昆明小鼠70只,随机分成7组:正常对照组、肿瘤模型组、LBP、ASP、GLP、PGP和胸腺肽治疗组,每组 10只。第1 d除正常对照组外,每只鼠右前肢腋下接种U14宫颈癌瘤细胞2×106∶0.2 mL。第2 d开始,正常对照组和肿瘤模型组0.5 mL/d生理盐水灌胃,中药多糖组按纯多糖含量400 mg·kg-1·d-1灌胃,胸腺肽按成人用量100 mg/d根据体表面积折算成0.3 mg/d(生理盐水稀释成0.5 mL)灌胃,共21 d,每天记录小鼠肿瘤生长情况。……
