赵利军，门秀丽，李宏杰，孔小燕，吴 静，刘丽华

(河北联合大学基础医学院病理生理学教研室，河北 唐山 063000)

肢体缺血再灌注(limb ischemia－reperfusion，LIR)损伤是一个全身性的病理过程，常可累及心、脑、肺等远隔器官[1]。调动机体内源性保护机制，减轻损伤程度，即预适应，是目前再灌注损伤研究领域的讨论热点。在众多预适应措施中，缺血后适应(ischemic postconditioning，IPostC)因其可操作性方面的优势，逐渐受到人们的重视。IPostC可通过抗氧化酶的激活、抑制炎症反应等启动细胞保护通路[2]。此外，目前关于IPostC器官保护作用的研究多是针对缺血器官本身而言的，临床可行性会受到一定的限制。本研究借鉴缺血后适应的处理方法，观察发生在肢体的IPostC对远隔组织——心肌的保护效应。

材料和方法

1 动物与分组

健康SPF级雄性Wistar大鼠24只，体重200～250 g，购自河南医科大学实验动物中心。动物术前24 h禁食，饮水自由。动物随机分为3组(每组8只):正常对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)和缺血再灌注+缺血后适应组(IR+IPostC组)。

2 动物模型制备及标本采集

复制大鼠LIR模型[1]，使用标准化弹性的橡皮带环绕结扎大鼠双后肢根部阻断血流4 h，然后松解橡皮带恢复血流灌注4 h。C组动物松弛结扎双后肢不阻断血流，IR+IPostC组在4 h缺血后，松解肢体恢复血流灌注5 min，再缺血5 min，反复5次进行缺血后适应，然后再进入4 h血流再灌注阶段。实验结束时自腹主动脉取血，4℃、3500 r/min离心15 min留取血浆，生化测定待用。取心肌组织100 mg，加入1 mL冷生理盐水，冰浴条件下电动匀浆3 min制备10%心肌组织匀浆，3500 r/min低温离心15 min留取上清液，进行心肌组织各项生化指标检测。……