赵 强，张志伟，刘重元，杨 科，谢 妮，张 婕

(1肿瘤细胞与分子病理学湖南省高校重点实验室，南华大学肿瘤研究所，2南华大学附属第一医院病理科，3南华大学医学院，湖南 衡阳 421001)

EB病毒(Epstein－Barr virus，EBV)感染与鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)的发生密切相关[1]，其编码的潜伏膜蛋白 1(latent membrane protein 1，LMP1)是重要的致瘤蛋白[2]。羧基端胞浆区是LMP1将信号转导至细胞内、活化不同信号通路而发挥其生物学功能的重要部位，包含3个羧基端功能活性区(carboxyl terminal activating region，CTAR)，即 CTAR1、CTAR2和 CTAR3[3－4]。前期，我们筛选到LMP1调节的p27与核糖体磷蛋白大亚基P0(ribosomal phosphoprotein large P0，RPLP0)蛋白[5，12]。为进一步了解LMP1与调节蛋白质在组织中表达相关性，本文检测LMP1调节的p27与RPLP0蛋白在鼻咽上皮和鼻咽低分化鳞状细胞癌中的表达情况，分析蛋白质间的相互调节规律及临床病理学意义，为揭示EB病毒与鼻咽癌发病的分子机制提供实验资料。

材料和方法

1 材料

收集2009年8月～2010年10月南华大学附一医院的鼻咽上皮组织石蜡块30例(其中男性18例，女性12例，平均年龄35岁)和鼻咽低分化鳞状细胞癌组织石蜡块60例(其中男性41例，女性19例，平均年龄44.5岁)。另外收集鼻咽部活检新鲜标本鼻咽上皮组织和鼻咽低分化鳞状细胞癌组织各10例，其中LMP1阳性组织各5例。

2 免疫组织化学染色

将制备好的石蜡切片二甲苯脱蜡2次后水化;PBS洗片3次，每次3 min;浸入盛有枸橼酸盐缓冲液容器中微波炉加热进行抗原修复;加3%过氧化物酶阻断液，37℃ 15 min;PBS洗片3次，每次3 min;加足量非免疫性动物血清，37℃ 10 min;分别滴加Ⅰ抗(抗LMP1和p27蛋白抗体为福建迈新生物技术有限公司产品，克隆号为 CS1－4和 MAB－0242;RPLP0蛋白抗……