霍冬梅 伍巧源 冯 炜 张影华 廖蕴华

(广西医科大学第一附属医院肾内科，南宁市 530021)

急性肾损伤(AKI)是一种常见的临床综合征，其病死率很高。已发现在原发肾脏疾病及糖尿病肾病肾组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达常有改变，并且参与了疾病的发生、发展及转归。而在AKI时VEGF水平变化研究较少。本文在建立大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)模型的基础上，采用双抗体夹心ELISA法和快速型免疫组化二步法检测IRI术后不同时间段肾脏组织VEGF表达水平，并与肾功能、肾小管坏死等相关指标做相关分析，以了解VEGF在肾脏IRI中的作用，为AKI发病机制以及治疗提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 实验对象 健康雄性 Wistar大鼠 60只，体重(268.9±8.94)g，随 机 分 成 假 手 术 组、手 术 组 2 组(各30只)。两组大鼠再分别随机分成手术后5个不同时段亚组(6、12、24、48、72 h)，每个亚组6 只大鼠，各亚组大鼠体重差异无统计学意义。

1.2 实验方法 实验参照Jorge等［1，2］的方法，每组大鼠均以水合氯醛腹腔内注射麻醉后，经背双侧肋弓下缘距脊柱约0.5 cm处行约长1.5 cm的纵行切口，钝性分离并暴露双侧肾脏，各组处理分别如下，①手术组:小心分离双侧肾动脉，用无创性动脉夹夹闭双侧肾动脉，双侧肾脏颜色先由鲜红色变苍白，然后转为暗红色，60 min后松夹恢复灌注，肾脏颜色再变成鲜红色，确定肾脏恢复血流后逐层关腹并缝合切口，建立肾脏 IRI模型，术后大鼠自由摄食和饮水。②假手术组:暴露双侧肾脏后，覆盖浸有生理盐水的纱布，60 min后去除纱布后逐层关腹，缝合切口，术后大鼠自由摄食和饮水。……