蔡亚萍

（福州市工业产品生产许可证审查技术中心，福建 福州 350000）

灭多威为氨基甲酸酯类内吸型广谱杀虫剂，其稳定性较差，尤其在通风、日光或较高温度下会迅速分解；灭多威代谢物为灭多威肟，化学分子式为C3H7NOS，相对分子量为105，其稳定性比较高［1－2］。除虫脲的化学分子式为 C14H9ClF2N2O2，是属于苯甲酰脲类农药，能够抑制昆虫几丁质合成，使昆虫变态受阻，不能蜕皮而致死［3］。杀螟丹化学名称为1，3－二－ （氨基甲酰硫）－2－二甲基氨基丙烷，是杀蚕毒素类杀虫剂，具有内吸、胃毒、触杀等多种作用，效果迅速，持效期长，杀虫谱广，对鞘翅目、半翅目、直翅目、蓟马等害虫均有很好的防治效果［4－5］。随着人们对食品中农药残留的意识也逐渐加强，农药残留的监测也日益受到重视。我国关于茶叶中灭多威的残留量限量是3 mg／kg，除虫脲的限量是20mg／kg，杀螟丹的限量是20mg／kg。

目前在土壤、蔬菜和水果等基质比较简单的样品中对灭多威、除虫脲和杀螟丹的残留分析较多，而相对于基质比较复杂的茶叶中对灭多威、除虫脲和杀螟丹的残留分析方法报道较少［6－19］。本研究采用HPLC－MS／MS法对茶叶中灭多威、除虫脲和杀螟丹的残留进行分析，该方法具有快速、简便、灵敏、准确等优点，并在实际样品检测应用中结果良好，能满足日常茶叶中有机磷农药残留的分析测定要求。

1 材料与方法

1．1 仪器与试剂

试验采用Agilent1200LC／6410MS色谱－串联四级杆质谱联用仪。所用试剂均为色谱纯，水为超纯水。灭多威、除虫脲和杀螟丹混合标准工作溶液（1μg／mL）：分别准确称取1．0010g、1．0013g和1．0027g，用甲醇溶解定容10mL，再分别准确量取10μL置于10mL容量瓶中，用甲醇定容，得到1μg／mL混合标准工作溶液，置于冰箱于4℃下保存。

1．2 色谱－质谱条件

色谱条件：Agilengt Zorbax XDB C18色谱柱（2．1mm×50mm，3．5μm）；流动相：乙腈－1‰甲酸水，流速：200μL／min，进样量10μL。

质谱条件：灭多威、杀螟丹以电喷雾 （ESI）正离子电离模式；除虫脲以负离子模式电离。电喷雾电压4000V；干燥气 （氮气）温度350℃，流量9．00L／min；雾化气 （氮气）压力275．8kPa；多反应监测 （MRM）模式检测，质谱分析参数见表1。

1．3 试验方法

称取粉碎茶样约5g于50mL具塞三角瓶中，加25mL乙腈提取液，于 （43±2）℃的震荡器中震荡提取45min，冷却后转移至具塞试管或离心管静置澄清。以5mL乙腈＋甲苯 （3∶1）预洗Cleanet TPT小柱，弃去淋洗液。加入2mL提取液，用25mL乙腈＋甲苯 （3∶1）洗脱液洗脱，KD瓶收集以上洗脱液。于45℃水浴上氮吹至干，加2mL甲醇溶解，过0．2μm滤膜，上机检测。

表1 灭多威、除虫脲和杀螟丹的质谱分析参数

2 结果与讨论

2．1 萃取溶剂的选择

灭多威、除虫脲和杀螟丹均属于有机磷类农药。乙腈对极性物质的提取效率比较好，从基体中提取的共提干扰物较少，相对于乙酸乙酯和正己烷等萃取溶剂来说，选用乙腈作为萃取溶剂，对灭多威、除虫脲和杀螟丹的提取效率较为理想。

2．2 净化条件的选择

对于茶叶样品，考虑到样品的极性及提取液中色素等大量复杂成分的存在，试验选用了Cleanet TPT小柱，以进一步除去样品中的复杂干扰物质，达到较好的净化效果。使用不同比例的乙腈、甲苯混合溶液作为洗脱溶剂时，当乙腈、甲苯比例为3∶1能达到最好的洗脱效果，因此选择乙腈＋甲苯（3∶1）溶液为洗脱液。

2．3 仪器条件的选择

2．3．1 液相色谱条件的选择 为了能更好实现3种农药的同步分离，对色谱方法的流动相做了优化。对比了乙腈＋甲酸水溶液、甲醇＋乙酸铵水溶液、甲醇＋甲酸水溶液、乙腈＋乙酸铵水溶液等4种流动相的色谱效果。试验表明，用乙腈－1‰甲酸水进行梯度洗脱时，能达到较好分离效果。最终优化的仪器条件为：色谱柱C18柱， （3．5μm，50mm×2．1mm）；流动相： （A）1‰ 甲酸水溶液， （B）乙腈 （表2）；柱温：30℃；流速：200 μL／min；进样量10μL。

2．3．2质谱条件的选择 灭多威、杀螟丹以电喷雾（ESI）正离子电离模式，除虫脲以负离子模式电离，实现3种农药的定性定量分析。

2．4 标准曲线和检出限

在仪器工作条件下对灭多威、除虫脲和杀螟丹混合标准溶液系列进行测定，以标准物质的质量浓度对其峰面积进行线性回归，结果 （表3）表明：3种农药的质量浓度在0．1～10μg／mL范围内呈线性。

2．5 方法的回收率

取6份茶叶各5．00g，分别加入适量的灭多威、除虫脲和杀螟丹混合标准溶液，按试验方法处理后测定灭多威、除虫脲和杀螟丹的含量，结果见表4。

表3 回收试验结果 （n＝6）

表4 回收试验结果 （n＝6）

3 小结

本试验建立了HPLC－MS／MS检测茶叶中的灭多威、除虫脲和杀螟丹的方法，采用乙腈－1‰甲酸水作为流动相，进行梯度洗脱，方法重现性好，操作简便，并且灵敏度、准确度、精密度均符合农药残留技术测定要求，适用于茶叶的日常检测。

［1］方仁慈，邢晓东，陈式棣，等 ．灭多威肟和灭多威的热稳定性［J］．农药，1997，36 （2）：16－17．

［2］张曼平，战闰，夏宗风 ．灭多威的光催化降解动力学研究［J］．高等学校化学学报，1998，19（9）：1475－1478．

［3］何康 ．中国农业百科全书：农药卷 ［M］．北京：中国农业出版社，1993：10．

［4］王振荣，李布青 ．农药商品大全 ［M］．北京：中国商业出版社，1996：216．

［5］朱俊庆 ．茶树害虫 ［M］．北京：中国农业科技出版社，1999：166．

［6］孙翠香，毕鸿亮，张浩原，等 ．高效液相色谱法测定土壤中农药灭多威的含量 ［J］．生态环境，2007，16（3）：887－889．

［7］殷春杭，钱允辉，王志强 ．甘蓝中灭多威农药残留分析方法［J］．安徽农学通报，2007，13 （18）：165－166．

［8］何红梅，吴俐勤，章虎，等 ．蔬菜中苯甲酰脲类药物残留的测定方法研究 ［J］．分析化学，2006，34（10）：1379－1383．

［9］张清明，花日茂，汤锋，等 ．梨中除虫脲、氟虫脲、氟啶脲的残留分析方法 ［J］．农药，2008，47 （7）：512－520．

［10］韩红新，吴莉宇，徐志，等 ．液质联用 （ESI）检测蔬菜中4种农药残留 ［J］．农药，2008，47 （3）：512－520．

［11］丁慧瑛，谢文，周召千，等 ．蔬菜中11种苯甲酰脲类农药残留的液相色谱－串联质谱法测定 ［J］．分析测试学报，2009，28 （18）：970－974．

［12］王连珠，周昱，陈泳，等 ．果蔬中8种苯甲酰脲类农药残留量的液相色谱－串联质谱法测定 ［J］．分析测试学报，2010，29 （3）：289－293．

［13］王坤芳，张泽华，高松，等 ．杀螟丹在水稻植株及稻田土壤、水中的残留降解动态研究 ［J］．农药科学与管理，2008，29（4）：17－25．

［14］徐应明，李军幸，戴晓华，等 ．杀螟丹98%可溶性粉剂在甘蓝和土壤中的残留动态研究 ［J］．现代科学仪器，2003，3（1）：48－51．

［15］黄永春，黄士忠 ．杀螟丹在苹果上残留动态研究 ［J］．农业环境科学学报，2003，22 （1）：113－115．

［16］宋薇 ．一种气相色谱法对粮谷中杀螟丹残留量的测定方法：中国，201110076257 ［P］．2011－09－28

［17］吴刚，虞慧芳，鲍晓霞，等 ．茶叶中杀螟丹残留的气相色谱分析方法研究 ［J］．中国食品学报，2006，6 （5）：129－132．

［18］吴刚，虞慧芳，鲍晓霞，等 ．气相色谱－微池电子捕获检测器分析茶叶中杀螟丹的残留 ［J］．色谱，2007，25 （2）：288－289．

［19］吴余颖 ．食品中苯甲酰脲类农药残留分析研究 ［D］．福州：福建农林大学，2009．