慢性饮酒对大鼠肺组织中TIMP-1表达的影响*
2012-07-16于洪志杜钟珍
王 星 吴 琦 于洪志 杜钟珍
自20世纪80年代起我国酒类消费急剧增加,城市居民成人饮酒率达38.8%~59.0%,饮酒相关问题已严重影响我国人民的身心健康,全球近4%的死亡与乙醇有关[1]。有研究表明,乙醇与急性肺损伤、哮喘、慢性阻塞性肺疾病等多种肺病有关[2]。乙醇可以引起肝、肾等脏器纤维化。本研究旨在通过观察慢性摄入乙醇大鼠的肺组织改变,以探讨乙醇和肺纤维化之间的关系。
1 材料与方法
1.1 实验动物 健康雄性清洁级Sprague-Dawley大鼠20只,160~200 g,购自中国协和医科大学放射科研究所,饲养于天津医科大学动物实验中心。
1.2 主要试剂 根据文献[3]方法自行配制Lieber-Decarli乙醇饲料(Lieber-Decarli Rat Ethanol Diet)和 Lieber-Decarli对照饲料,该配方饲料含热量4 185.85 J/mL。其中乙醇饲料热量:35%来自脂肪,11%碳水化合物,18%蛋白,36%乙醇;对照饲料热量:35%来自脂肪,47%碳水化合物,18%蛋白。大鼠基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1酶联免疫分析试剂盒购自武汉华美生物工程有限公司。Masson三色染液购自珠海贝索生物技术有限公司。
1.3 动物分组、模型的建立及标本处理 将20只大鼠按体质量编号,采用随机数字表法分成乙醇组和对照组,每组10只。对照组每日给定量Lieber-Decarli对照饲料单笼喂养;乙醇组每日给定量Lieher-Decarli乙醇饲料单笼喂养,不再提供饮水。16周后,将大鼠称质量后经2%水合氯醛(50 mg/kg)腹腔内注射麻醉,采用腹主动脉放血处死动物。沿胸骨中线打开胸腔,完整分离气管和肺组织。取右肺下叶放入10%福尔马林溶液内固定,行HE染色、Masson染色;右肺上叶、中叶先于液氮中保存之后一起转存于-70℃低温冰箱,制作组织匀浆测羟脯氨酸(HYP)、谷胱甘肽(GSH)和TIMP-1含量。……
