崔书霞 郝志梅 郭志义 郝小惠 王素云 田 炜

前列腺癌（prostate cancer，PCa）是男性生殖系统常见的恶性肿瘤，近年来随着社会的老龄化和饮食习惯的西方化，PCa的发病率显著增高[1]。目前普遍认为PCa为雄激素依赖性肿瘤，其发生与雄激素的刺激有关，雄激素受体（adrogen receptor，AR）在介导雄激素生物学效应上发挥着重要作用[2]。泌乳素相关蛋白（prolactin inducible protein，PIP）是一种15～17 ku的糖蛋白[3]，广泛存在于精液、唾液、乳汁等体液中，并发挥着多种生物学作用[4]。PIP可作为一种肿瘤标志物被用来诊断乳腺来源的转移癌[5]。最近研究发现，前列腺上皮细胞也能产生PIP，在前列腺癌中PIP有过度表达，并与前列腺特异抗原（PSA）存在共表达[6-7]。本研究探讨PIP在前列腺癌细胞系中的表达情况，以及雄激素对其表达的影响，为进一步探讨前列腺癌的发病机制提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料 人前列腺癌细胞系LNCaP、PC-3、DU145及人乳腺癌细胞系T47D均购自中国科学院细胞库。兔抗人GCDFP-15（PIP）多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司，鼠源GAPDH多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG及辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG购自中杉金桥生物有限公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 于含10%胎牛血清（FBS）、双抗（青霉素100 U/mL， 链霉素 100 mg/L） 的 RPMI1640 （LNCaP、PC-3、DU145）或 DMEM（T47D）培养基中，置于 37 ℃、5%CO2、饱和湿度的孵箱中培养。细胞生长状态良好，达到对数生长期时，将细胞按1×104/mL接种于培养瓶或6孔板内，孵箱孵育24 h后待用。

1.2.2 处理及分组 各培养细胞系分为空白对照组、不同浓度及不同时间处理组，不同浓度处理组应用（0.1、1、10、100 nmol/L） 双 氢 睾 酮 （Dihydrotestosterone，DHT） 或 睾 酮（Testosterone，T）分别对各细胞系进行处理，不同时间处理组为应用10 nmol/L DHT或T处理6、24和48 h。……