王晓蓉，苑洪菲，王黎娜，于 波

环境污染物是造成不孕、流产和胎儿畸形的主要原因之一。研究发现，早期胚胎发育阶段对环境污染物更加敏感［1］，明确其致病机制，寻找有效的监测和预防手段一直为临床所关注。甲氧滴滴涕作为一种替代滴滴涕的有机氯杀虫剂目前在许多国家得到广泛应用，近年研究发现MXC 具有多方面的毒性作用，尤其以生殖毒性引人注目［2］。研究表明，MXC 是一种环境内分泌干扰物(endocrine disrupting chemicals，EDCs)，具有雌激素样作用，胚胎和胎儿是MXC 最敏感的靶器官之一，MXC 体内羟基代谢产物的雌激素样作用强于MXC。MXC 的毒性作用机制与ERα 密切相关，其代谢产物是ERα 的激动剂，可以通过ERα 介导产生相应的生物学效应，同时可以改变不同组织ERα 的表达水平［3，4］。然而，有关MXC 影响早期胚胎发育的研究报道较少，笔者通过构建孕鼠早期胚胎发育MXC 染毒模型，检测MXC 染毒对孕鼠胎盘组织ERα 表达的影响，探讨MXC 影响雌性生殖健康和胚胎发育的毒性作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 昆明种小鼠60 只(雌性40 只，雄性20 只)，8 周龄，平均体重(28.12 ±3.3)g，由第四军医大学实验动物中心提供，自由饮食、饮水，清洁级饲养。

1.2 试剂及仪器 MXC(批号:49054，纯度:99%，Sigma 公司)，芝麻油(批号:S3547，Sigma－Aldrich公司)、雌二醇(批号:10006315，纯度＞98%，Cayman Chemical 公司)、兔抗鼠ERα 单克隆IgG 抗体(Santa Cruz 公司)、Trizol 总RNA 抽提试剂盒(Invitrogen 公司)、RT 试剂盒(Invitrogen 公司)、DAB 显色试剂盒(武汉Boster 生物工程公司);ABI7300 Real－Time PCR 检测仪(ABI 公司)、LX70 倒置显微镜(Olympus 公司)、凝胶成像系统(UVP 公司)。

1.3 构建孕鼠MXC 染毒模型 孕鼠随机分组，每组10 只，分别为MXC 染毒组、正常对照组与阳性对照组。依据文献［5］，妊娠0.5 ～7.5 d，MXC 染毒组孕鼠皮下注射MXC 166.67mg/(kg·d)，正常对照组孕鼠皮下注射芝麻油，阳性对照组孕鼠皮下注射雌二醇(1.0 μg)。……