浙江大学饲料科学研究所 栾兆双 左安燕 胡彩虹＊

嘉兴市凯越饲料有限公司 高振岭 罗天生

中华鳖对蛋白质的需要量较高，其饲料配制严重依赖鱼粉。由于鱼粉短缺，价格昂贵，目前大量研究开始集中于用其他蛋白源替代鱼粉。然而，当鱼粉蛋白被部分或全部替代势必导致水生动物对某些氨基酸缺乏。用合成氨基酸来平衡饲料中的氨基酸比例是提高饲料蛋白质利用率和节约蛋白质资源、降低饲料成本的有效途径之一。饲料中添加游离态氨基酸，如晶体赖氨酸、蛋氨酸已普遍应用于畜禽养殖。但大量研究表明，鱼、虾不能有效地利用游离氨基酸。微胶囊及各种包膜技术可以延缓营养物质的释放，包膜氨基酸在鱼虾上的应用已有较多报道 （迟淑艳等，2010；Alam等，2005；刘永坚等，2002）。而包膜氨基酸在中华鳖上的应用研究还鲜有报道。本试验研究包膜赖氨酸对稚鳖生长性能的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 普通赖氨酸盐酸盐：纯度98%，赖氨酸含量78%。包膜赖氨酸盐酸盐：自制，芯材赖氨酸含量35%，壁材组成为硬脂酸和甘油酯。

1.2 试验设计 在正式试验开始以前，对试验鳖进行为期2周的人工驯化，以使其适应试验期间的养殖环境、投喂制度和试验料，直到行为安逸，摄食正常，方可进入正式试验期。选择180只平均体重为18.40 g稚鳖随机分为3组 （每组6个重复，每重复10只），分别饲喂赖氨酸缺乏（赖氨酸水平1.51%），添加晶体赖氨酸和包膜赖氨酸（赖氨酸水平2.62%）的等能等氮半纯合成饵料。试验饵料配方参考周小秋等（2001），见表1。试验饵料所添加的赖氨酸部分用谷氨酸等氮代替，除赖氨酸外其他氨基酸模式与中华鳖鳖体氨基酸组成模式一致，蛋白质、微量元素、维生素需要参考NRC（1993）鳗鱼的需要量。

表1 试验饵料组成及营养水平

中华鳖饲养于80 cm×50 cm×50 cm的自动控温控氧的室内水族箱中。水族箱底1/3铺消毒后的河沙6 cm厚，水位高度保持9 cm，水温恒定在（28.2±0.4）℃，自动供氧。每天早上 8∶00 将粉状饵料用水调湿成面团状放在离水面5 cm高的食台上，保持安静，鳖从木板桥爬到食台上摄食。3天换水一次，换水量为总量的1/3。换水时将食台消毒。试验期60 d。

试验结束时，中华鳖空腹24 h后，从每组随机取鳖6只，采血制备分装于eppendorf管，取肝脏样品，置-70℃冰箱保存，备用。

1.3 试验方法

1.3.1 晒背率、惊吓逃跑率、腐斑率和成活率在试验第20、40天和60天13∶00观察食台上鳖数，然后开门惊吓并记录逃跑数。计算公式如下：晒背率、惊吓逃跑率、腐斑率等。晒背率（食台上鳖数/试验鳖数）；惊吓逃跑率（惊吓逃跑数量/食台上总鳖数）；腐斑率（腐斑鳖数/观察数）。

1.3.2 生长性能

特定生长率 （SGR）/%=（1nBWf-1nBWi）/T×100；

蛋白质效率 （PER）＝（BWf-BWi）/（FI×PC）×100；

饲料转化率（FCR）＝FI/（BWf+BWo-BWi）×100；

存活率（SR）/%＝SNf/SNi×100；

式中：BWf为终末重 （g）；BWi为初始重，g；BWO为死亡个体重，g；T 为饲养试验时间，d；FI-中华鳖所摄取的日粮量，g；PC为日粮中的蛋白质含量，g；SNi为初始存活数；SNf为终末存活数。

1.3.3 血清游离赖氨酸 取血清1.0 mL，加人2.0 mmol/L EDTA 0.5 mL，2%5-磺基水杨酸1.0 mL混匀，静置l h后，4000 r/min，4℃ 条件下离心10 min。然后，取上清液0.25 mL，加人0.02 mol/L HCl 5 mL，0.22 μm聚乙烯滤膜过滤后用全自动氨基酸分析仪（日立8800）测定。

1.3.4 肝脏赖氨酸-α-酮戊二酸还原酶活性 肝脏样品匀浆，参考Walton等（1984）的方法测定。

1.4 数据统计 结果以平均值±标准差表示。各处理间平均值的比较采用方差分析中的Duncan’s new multiple-range test，计算程序采用SAS（6.12）中的一般线性模式进行。

2 结果与分析

2.1 对鳖生活力的影响 由表2可见，赖氨酸缺乏的对照组中华鳖晒背率、惊吓逃跑率较低，腐斑率较高，说明赖氨酸缺乏降低了鳖生活力。添加晶体赖氨酸和包膜赖氨酸均提高了鳖晒背率、惊吓逃跑率，鳖生活力得到提高，且包膜赖氨酸作用效果优于晶体赖氨酸。

2.2 对生长性能的影响 从表3可见，与对照组相比，添加包膜赖氨酸组的中华鳖特定生长率、蛋白质效率和存活率分别显著提高44.35%、35.88%和11.52%（P＜0.05）；饵料系数显著降低9.14%（P＜0.05）。本试验结果表明，添加晶体赖氨酸可提高中华鳖生长性能，且包膜赖氨酸作用效果优于晶体赖氨酸。

表2 赖氨酸对中华鳖生活力的影响 %

表3 赖氨酸对中华鳖生长性能的影响

2.3 对肝脏赖氨酸-α-酮戊二酸还原酶活性的影响 从表4可见，与对照组相比，添加晶体赖氨酸和包膜赖氨酸，中华鳖肝脏赖氨酸-α-酮戊二酸还原酶活性分别显著提高20.35%（P＜0.05）和52.21%（P＜0.05）。由此结果可见，包膜赖氨酸作用效果优于晶体赖氨酸。

表4 赖氨酸对中华鳖肝脏赖氨酸-α-酮戊二酸还原酶活性的影响

2.4 对血清游离赖氨酸的影响 由图1可见，赖氨酸缺乏的对照组和晶体赖氨酸组鳖摄食后6 h内血清游离赖氨酸在2 h左右达到高峰水平，而包膜赖氨酸组在4 h左右达到高峰水平，由此可见，包膜赖氨酸可延缓血清游离赖氨酸达到高峰浓度的时间，促进机体组织氨基酸的有效利用。

3 讨论

目前，关于鳖赖氨酸需要量的研究报道较少。鳖赖氨酸需要量一般借鉴鳗赖氨酸需要量（Arai，1972）。周晓秋等（2001）研究了稚鳖赖氨酸营养的需要量，确定的其需要量为2.40%。本试验对照组含赖氨酸1.51%，应为赖氨酸营养缺乏。结果表明，赖氨酸缺乏可引起鳖生活力下降、生长受阻、肝脏赖氨酸-α-酮戊二酸还原酶活性下降，这与周晓秋等（2001）的报道一致。其他研究认为，赖氨酸缺乏将增加虾的死亡率、摄饵量下降和生长受阻（Milamena等，1998），降低虹鳟肝脏赖氨酸-α-酮戊二酸还原酶活性（Walton等，1984）。

在水产动物饲料中添加晶体氨基酸效果较差，其主要原因是：晶体氨基酸在水中浸泡流失；游离态和结合态氨基酸在体内吸收不同步，存在消化吸收时间差，导致实际利用率低（刘永坚等，2002；Berge等，1994）。本试验通过对氨基酸进行包被，结果表明，添加包膜赖氨酸显著提高了鳖生活力、增重和蛋白质效率，作用效果优于晶体赖氨酸。赵春蓉（2005）研究表明,稳定化赖氨酸能提高幼建鲤全期和各阶段增重和饲料利用率，与晶体形式赖氨酸盐酸盐相比，增重提高14%。本试验结果与此结果一致。稳定化氨基酸能提高水生动物生长速度，可能原因在于经稳定化处理的氨基酸，能降低游离氨基酸的溶解和吸收速度，增加氨基酸在肠道的滞留时间，利于氨基酸吸收平衡，更多的氨基酸可用于合成蛋白质，促进动物生长（刘永坚等，2002）。本试验也证实了包膜赖氨酸可延缓血清游离赖氨酸达到高峰浓度的时间，促进机体组织氨基酸的有效利用和蛋白质的合成。

[1]迟淑艳，林黑着，谭北平，等.低鱼粉饲料中添加微胶囊或晶体蛋氨酸对凡纳滨对虾消化酶活性的影响[J].现代农业科技，2010，11：308～310.

[2]刘永坚，田丽霞，刘栋辉.实用饲料补充结晶或包膜赖氨酸对草鱼生长、血清游离氨基酸和肌肉蛋白质合成率的影响[J].水产学报，2002，26：252～258.

[3]赵春蓉.赖氨酸对幼建鲤消化能力和免疫功能的影响：[硕士论文][D].四川雅安：四川农业大学，2005.

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[5]Alam M S，Teshima S，Koshio S，et al.Supplemental effects of coated methionine and/or lysine to soy protein isolate diet for juvenile kuruma shrimp，Marsupenaeus japonicus[J].Aquaculture，2005，248：13～19.

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[7]Berge G E，Lied E，Espe M.Absorption and incorporation of dietary free and protein bound （U14C）-lysine in Atlantic cod （Gadus morhua）[J].Comparative Biochemistry and Physiology，1994，109：681～688.

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