邓世康 王航平 李力燕 王廷华

1（昆明医学院 神经研究所，昆明650031）

2（云南师范大学 体育学院，昆明650000）

前言

肾上腺作为人体重要的内分泌器官在应激和损伤状态下的反应备受重视［1］，但在运动与健康调节活动中的作用及分子机制则知之甚少。游泳是一种普遍的运动训练，不论从健身角度还是从专业训练角度在民间和官方均广为重视。但游泳与肾上腺的关系却了解不多。Cyclin D1是一个重要的真核细胞有丝分裂因子，与细胞增殖和凋亡有关［2－3］。Cyclin D1的水平可能决定着细胞的命运。本实验中，我们用负重游泳大鼠模型，研究不同负重条件下肾上腺Cyclin D1的表达变化，为了解游泳负重训练对肾上腺Cyclin D1的影响提供分子实验依据。

1 材料和方法

1.1 动物及分组

成年SD大鼠体重200±20 g，购自昆明医学院实验动物中心。分为中度负重（占体重3%）和重度负重（5%）组及对照组。

1.2 游泳模型

用自制水槽进行游泳训练，将大鼠每天放入水槽游泳1 h。第6周末停止训练。

1.3 样本获取

训练6周结束时，处死各组大鼠，取肾上腺用RT－PCR检测肾上腺Cyclin D1mRNA水平。

1.3 RT－PCR

按文献方法进行RT－PCR。所用模板为肾上腺组织来源的cDNA，引物为Cyclin D1上、下游引物（上 游：5′－GGAGCAGAAGTGCGAAGAGG－3′，下游：5′－GAGGGTGGGTTGGAAATGAA－3′）。片段长度396 bp，退火温度52℃。以β－actin为内参照（上 游：5′－GTAAAGACCTCTATGCCAACA－3′；227 bp 下 游：5′－GGACTCATCGTACTCCTGCT－3′，退火温度52.5℃）按如下条件进行PCR扩增下游：扩增产物经电泳成像后进行光密度测定，以Cyclin D1电泳带和β－actin电泳带的灰度值的比值进行统计学分析。获取各组Cyclin D1基因表达水平相对光密度值，计算Cyclin D1mRNA相对含量，并进行统计学分析。

1.4 统计学分析

组间比较用t检验进行。P小于0.05为有统计学意义。……