HPLC法同时测定热毒清颗粒中绿原酸和连翘酯苷A的含量Δ
2012-05-21鲍涵张忠义张军黄宝明广州中医药大学广州50405南方医科大学珠江医院广州50280
鲍涵,张忠义,张军,黄宝明(.广州中医药大学,广州 50405;2.南方医科大学珠江医院,广州 50280)
热毒清颗粒由金银花、连翘、大青叶、荆芥、钩藤等15味药材组成,具有疏风解表、清热解毒、利咽止咳等功能,主治风热兼湿型外感,症见发热、咽喉肿痛、咳嗽等。金银花和连翘为君药,绿原酸及连翘酯苷A分别为其指标性成分,其中绿原酸具有广泛的抗菌活性[1,2],还具有抗病毒[3]、抗炎解热[4]等作用;连翘酯苷A具有很强的抗菌活性,对金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌、白色念珠菌有明显的抑制作用[5],且体外抑病毒作用较强,尤其对呼吸道最常见病毒合胞病毒具有明显的体外抑制作用[6],同时对活性氧具有较强的清除能力,是一种有效的天然抗氧化剂[7]。笔者采用高效液相色谱(HPLC)法同时测定热毒清颗粒中绿原酸和连翘酯苷A的含量,方法简单、快捷,可用于热毒清颗粒的质量控制。
1 仪器与试药
LC-20A型HPLC系统,包括紫外检测器、LC-20AT型泵、SIL-20A型自动进样器、Lab solution色谱工作站(日本岛津公司);CP225D型万分之一分析天平、AB204-N型十万分之一分析天平(瑞士Mettler Toledo公司)。
绿原酸对照品(中国食品药品检定研究院,批号:110753-200413);连翘酯苷A对照品(上海融禾医药科技有限公司,批号:100920);热毒清颗粒(南方医科大学珠江医院自制,批号:110509、110510、110511);甲醇(色谱纯,德国默克公司),液相用水为超纯水,其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:Phenomenex C18柱(250mm×4.6mm,5 μm);流动相:甲醇为流动相A,0.1%磷酸为流动相B,梯度洗脱程序为0(22%A)→10min(30%A)→13min(34%A)→30min(34%A)→32min(22%A)→35min(22%A);流速:1.0mL·min-1;检测波长:330 nm;进样量:10µL;柱温:25℃。在此色谱条件下,绿原酸和连翘酯苷A分离度良好,空白无干扰。……
