余王景璐，朱延焱，江丽莉，刘素霞

(浙江省丽水市中心医院检验科，浙江 丽水 323000)

肠球菌(enterococcus)为圆形或椭圆形、呈链状排列的革兰阳性球菌，是临床感染常见菌株，常引起呼吸道、泌尿生殖道、腹腔等部位的感染[1]。近年来，随着临床上广谱抗生素、免疫抑制剂的广泛应用，以及各种侵入性治疗机会的增加，肠球菌耐药率逐渐升高，已成为在需氧革兰阳性球菌中仅次于葡萄球菌的重要院内感染致病菌[2]。尤其是耐万古霉素肠球菌菌株的增多，给临床治疗带来极大困难。为了解医院常见肠球菌分布特征及耐药特点，笔者对2006年1月至2010年12月从住院及门诊送检标本中分离到的肠球菌株973株进行菌种鉴定及药物敏感性试验，现报道如下。

1 材料与方法

1．1 仪器、试剂和菌株来源

采用VITEK－COMPACT2全自动微生物分析仪。标准抗菌药物纸片氨苄西林(10 μg)、奎奴普丁达福普丁(15 μg)、利奈唑胺(30 μg)、链霉素(300 μg)、青霉素 G(10 U)、庆大霉素(120 μg)、四环素(30 μg)、万古霉素(30 μg)、左氧氟沙星(5 μg)均为英国Oxoid公司产品。M－H琼脂粉为英国Oxoid公司产品。菌株来自2006年1月至2010年12月丽水市中心医院门诊及住院各类临床标本分离到的肠球菌973株(同一患者无重复株)。

1．2 药敏培养基的制备

将M－H琼脂粉19 g用500 mL蒸馏水溶解后，115℃高压蒸汽灭菌15 min。琼脂冷却至约55℃后，在半封闭式工作台上定量倾倒至直径为90 mm的平皿，4℃保存。

1．3 细菌鉴定及药物敏感性试验

K－B法细菌的接种量根据VITEK比浊仪调整至0．5麦氏浊度，使细菌的浓度达108cfu/mL后，将无菌棉签蘸湿，挤出多余水分后向3个方向均匀涂布于M－H琼脂平皿上，贴上抗菌药物纸片，置35℃的孵箱孵育18～20 h，根据美国临床实验室标准化委员会2007年指南M100－S17判读结果。粪肠球菌的质控菌株为ATCC29212。

2 结果

各临床科室菌株分离率最高为泌尿科(35．3%)，其次为监护室(19．4%)和呼吸科(12．2%)。具体统计结果见表 1至表4。

3 讨论

肠球菌属是人类和哺乳动物肠道的正常菌群，虽为低毒的革兰阳性球菌，但多数学者认为它是造成严重感染的重要病原菌[3]。医院从2006年至2010年送检标本中共分离出肠球菌973株，以注:“－”表示无，下表同。粪肠球菌和屎肠球菌为主。各类感染性标本分离的肠球菌中以尿液标本最多，其次为痰液标本。由于生殖道和泌尿道与肠道的生理位置比较接近，因此肠球菌的感染可能以易位感染为主。另外，肠球菌的感染分布范围已扩大，其原本不是引起呼吸道感染的主要致病菌，但此次有38．95%的标本来源于呼吸道痰液标本，说明肠球菌已逐渐成为了呼吸道感染的主要致病菌，使临床治疗难度加大，必须引起重视[4]。

表1 各年度临床标本分离菌株统计[株(%)]

表2 973株肠球菌在临床标本中的分布

表3 2006年至2010年医院粪肠球菌的耐药率(%)

表4 2006年至2010年医院屎肠球菌的耐药率(%)

肠球菌的感染以粪肠球菌所占比例最高，其次为屎肠球菌。通过对这两种肠球菌耐药现状的分析，基本上可以反映肠球菌的整体耐药情况[5]。肠球菌属细胞壁坚厚，对许多抗菌药物表现为固有耐药，如对头孢菌素天然耐药。本次研究显示，肠球菌属对青霉素的耐药率最高，2006年至2010年均达85%以上。目前，肠球菌引起的医院感染最严重的为耐万古霉素肠球菌。由于临床医师经常采用协同用药来加强治疗效果，如青霉素或万古霉素与氨基苷类药物进行联合治疗。高浓度氨基苷类药物与青霉素或万古霉素有协同作用，联合用药可加强对肠球菌属的抗菌活性。同时要看肠球菌属对高浓度庆大霉素是否敏感，若敏感则说明可发生协同作用[6]。因此实验室对肠球菌属应同时用高浓度庆大霉素和高浓度链霉素检测耐氨基苷类肠球菌。我院药物敏感性试验结果显示，粪肠球菌和屎肠球菌对高浓度庆大霉素的耐药率较高，因此临床上应根据药物敏感性试验结果选择敏感的抗菌药物进行治疗，这对于控制耐氨基苷类肠球菌的产生非常重要。从2006年至2010年，检出4株耐万古霉素的屎肠球菌、3株耐万古霉素的粪肠球菌。目前认为对万古霉素耐药的肠球菌是由质粒介导，并且传导到其他细菌，引起耐药性增多[7]。屎肠球菌的耐药性普遍高于粪肠球菌[8]，对高浓度的庆大霉素也是一样。

总之，近来不断出现耐万古霉素的肠球菌，给临床用药带来了极大的困难。应加强对万古霉素的用药监测，避免造成耐药菌株的广泛传播;加强院内感染控制，减少耐药菌株引起的医院环境污染;合理使用抗生素，严格使用原则，避免滥用，减少多重耐药菌的产生。

[1]罗燕萍，白立彦，李俊玲，等．211株肠球菌属细菌对18种抗生素的耐药性特征[J]．中华医院感染学杂志，2004，14(1):80－82．

[2]童照威，李晓峰，宋 群，等．常见革兰阳性球菌分布特征及药敏分析[J]．中国卫生检验杂志，2011，21(2):401 －403．

[3]刘淑梅，许淑珍，高向远，等．1 000株肠球菌耐药性分析[J]．中国抗生素杂志，2003，28(11):673 －675．

[4]郭卫真，刘 妮，卢东荣，等．457株肠球菌的分布及其耐药性分析[J]．当代医学杂志，2011，17(3):42 －43．

[5]杨其军．肠球菌属细菌对抗菌药物的耐药性分析[J]．中国药业，2010，19(17):9 －10．

[6]姜梅杰，孙启英，刘广丽，等．2007－2009年屎肠球菌及粪肠球菌的耐药性分析[J]．中华医院感染学杂志，2011，21(9):1 889－1 891．

[7]郭玲娇，狄云香，李秀丽．耐万古霉素屎肠球菌耐药基因的研究[J]．中华医院感染学杂志，2011，21(9):1 747－1 748．

[8]ELsner HA，Sobottka I，Feucht HH，et al．In vitro susceptibilities of enterococcal blood culture isolates from the Hamburgarea to ten antibiotics[J]．Chemotherapy，2000，46(2):104．