miR-214在肾上腺皮质肿瘤组织中的表达及意义
2012-04-13杨明妍罗佐杰邝晓聪秦映芬梁杏欢
杨明妍,罗佐杰,邝晓聪,秦映芬,梁杏欢,冼 晶
(1广西医科大学第一附属医院,南宁530021;2广西医科大学病理生理教研室)
微小RNA(miRNA)是一种长约22 nt的非编码小分子RNA,主要通过降解靶mRNA或抑制mRNA翻译而调节相关蛋白表达[1],其调节方式在许多生理、病理过程中起重要作用。近年研究表明,miRNA可能参与人类癌症的发生,有的miRNA可能有原癌基因或抑癌基因的作用,miR-214即为其中的一种[2~6]。miR-214是新近发现的miRNA,目前,关于miR-214对肾上腺皮质癌调控机制的研究少见报道。为探讨miR-214在肾上腺皮质肿瘤发生、发展中的作用,我们观察了miR-214在肾上腺皮质腺瘤组织、瘤旁正常组织、人肾上腺皮质癌SW-13细胞系(SW-13细胞系)和裸鼠皮下移植瘤组织中的表达情况。现报告如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料 选择2009年12月~2011年6月在广西医科大学第一附属医院施行肾上腺皮质肿瘤手术患者21例,男8例、女13例,年龄23~56 (40.7±10.4)岁。选取其术后肾上腺皮质切除组织,离体后迅速置于液氮中冷冻,-80℃保存。其中肾上腺皮质癌组织5份、肾上腺皮质腺瘤组织8份、肾上腺皮质腺瘤瘤旁正常组织(瘤旁正常组织) 8份,均经病理检查证实。另选本课题组前期研究保存的SW-13细胞系裸鼠皮下移植瘤组织6份,其造模和取材方法见文献[7]。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养 人肾上腺皮质癌SW-13细胞系购自上海中国科学院细胞库,采用含10%胎牛血清的DMEM/F12以1∶1比例作为培养基,将人肾上腺皮质癌SW-13细胞放置在37℃、5%CO2条件下培养。细胞生长至80%融合时,用2.5%胰酶消化并进行传代,取对数生长期细胞进行实验。
1.2.2 miRNA提取 采用天根生化科技公司产miRcute miRNA提取分离试剂盒提取总miRNA;最终获得的miRNA溶于无RNase水,-80℃保存。……
