邓夏珩，高 丽，顾 昊，左国平，沈 伟，郭 军

(1南京医科大学基础医学实验教学中心，南京210029;2南京医科大学附属脑科医院)

基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases，MMPs)是一组活性依赖钙离子和锌离子的中性蛋白酶基因家族，在各种组织中广泛表达，参与降解各种组织细胞外基质(ECM)［1］。现已识别20多种蛋白，其中MMP-9是MMPs家族的重要成员，其能破坏ECM降解的正常平衡，导致多种病理过程(如髓鞘脱失、血脑屏障损伤等)发生，在缺血性组织损伤的发生、发展中发挥重要的调节作用。胞外信号调节激酶(Extracellular signal-regulated kinase，ERK)是丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-actived protein kinase，MAPK)家族的首要成员，主要包括ERK1和ERK2，两者具有相似的结构和功能。钙信号能诱导ERK激活且伴随其自身磷酸化现象［2］，激活的ERK信号通路能上调多种基因表达。2011年4月，我们对缺血再灌注后海马脑区ERK信号通路和MMP-9表达进行了检测，旨在探讨ERK钙依赖性激活对海马区MMP-9表达的影响及其可能的生物学效应。

1 材料与方法

1.1 材料 清洁级成年雄性SD大鼠50只(南京医科大学实验动物中心)，体质量250 g左右，室温下饲养;ERK和磷酸化-ERK(p-ERK)抗体(Thr202 /Tyr204，Cell Signaling Technology公司);MMP-9(博奥森公司);N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体偶联钙通道抑制剂氯胺酮(Sigma公司)，ERK抑制剂U0216(Biomol公司)。

1.2 前脑缺血模型制备 取雄性SD大鼠20只随机分为模型组15只和假手术组5只，模型组采用四动脉阻断法建立前脑缺血模型［3］:水合氯醛(300 mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠后俯卧位固定，暴露第2颈椎，电灼两侧椎动脉，造成永久性闭塞;腹侧颈正中切口并分离颈总动脉，丝线标记;电灼24 h后动脉夹夹闭双侧颈总动脉，使大鼠脑部供血完全阻断; 10 min后松开动脉夹，再灌注6、12和24 h。……