周 玮 魏海云 牛佳木

目前研究发现COX-2在多种肿瘤组织及细胞中存在过度表达，与肿瘤的发生、发展过程密切相关，已成为肿瘤诊断及治疗的1个新靶点[1]。有关胃癌COX-2表达与CD4、CD8相关性研究尚未见报道。本研究检测胃腺癌、癌旁异型增生及正常胃黏膜组织中的COX-2、CD4及CD8表达及其与临床病理特征的关系，探讨COX-2促进肿瘤发生的新的分子机制。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集江西省肿瘤医院2008年1月至2008年12月间胃癌手术切除并经病理诊断证实的胃腺癌标本62例。其中男性39例，女性23例，年龄30～79岁，中位年龄54岁；高分化腺癌5例，中分化腺癌14例，低分化腺癌27例，印戒细胞癌11例，黏液腺癌5例。临床分期依据1997年国际抗癌联盟(UICC)TNM分期标准，Ⅰ～Ⅱ期23例，Ⅲ～Ⅳ 39例；淋巴结转移27例，无淋巴结转移35例。所有患者术前均未接受化疗、放疗及其他治疗。同时在标本中取胃腺上皮不典型增生22例，正常胃组织20例。

1.2 方法

所有标本均经过10%甲醛固定，石蜡包埋，制成4 μm厚的切片，采用免疫组化SP法进行COX-2、CD4及CD8染色。兔抗人COX-2多克隆抗体、MAB-0021鼠抗人CD8单克隆抗体、Rev 021602 鼠抗人CD4单克隆抗体，封闭用正常山羊血清工作液、生物素标记二抗工作液、过氧化物酶标记链霉素卵白素工作液。抗体均为美国Santa Cruz公司产品，购自北京中杉京桥生物技术有限公司。免疫组化染色按SP试剂盒操作说明进行，工作液浓度均为1∶150。

1.3 结果判定

COX-2、CD4、CD8均以细胞质出现棕黄色细胞颗粒为阳性细胞。按阳性细胞比例，组织蛋白表达强度分级：0个细胞着色为(-)；阳性细胞数<25%为(+)；阳性细胞数25%～50%为(++)；阳性细胞数>50%为(+++)。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 胃不同病变组织COX-2 、CD4、CD8蛋白的表达

腺癌组织与腺上皮异型增生组织的COX-2表达高于正常胃上皮组织，差异有统计学意义(P<0.05)。胃腺上皮异型增生组织中COX-2表达随分化程度加重逐渐升高，而高分化、中分化腺癌的COX-2表达显著高于低分化腺癌(P<0.05)；腺癌组与非典型增生组间COX-2表达差异无统计学意义(P>0.05)。……