张继运 沙新海 于明涛

乳腺癌是1种严重威胁妇女健康的恶性肿瘤，其发生、发展和转移是1个极其复杂的生物学过程，是多因素、多基因、多步骤突变的结果[1]。本研究采用免疫组化方法检测乳腺癌组织中C-erbB-2、p53、Ki-67及VEGF的表达，探讨其与乳腺癌临床病理特征的关系，进而探讨它们之间的相互关系。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集我院2010年1月～2011年12月诊治的72例乳腺癌标本。患者均为女性，年龄23～76岁、中位年龄47岁。术前患者均未做放、化疗。72例中浸润性导管癌34例，浸润性小叶癌4例，单纯癌17例，髓样癌8例，硬癌6例，黏液腺癌3例。乳腺癌Ⅰ期20例，Ⅱ期33例，Ⅲ期19例。肿瘤大小≤2 cm 26例，>2 cm 46例。有腋窝淋巴结转移42例，无腋窝淋巴结转移30例。

1.2 方法

所有标本经4%中性甲醛固定，梯度乙醇脱水，石蜡包埋，4 μm连续切片，免疫组化染色均选用福州迈新公司SP试剂盒，免疫组化染色用PBS代替一抗作阴性对照，光学显微镜下观察着色反应。

1.3 结果判定

C-erbB-2蛋白以细胞膜或细胞质内出现棕黄色颗粒为阳性判定标准；VEGF、p53蛋白均以细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性判定标准。光学显微镜下观察：以细胞膜及细胞核出现棕黄色或棕色颗粒的细胞作为阳性细胞，根据整张切片中阳性细胞占全部细胞的比例定为：100个高倍视野阳性着色细胞数<10%为"-"；阳性细胞数10%～30%为"+"；阳性细胞数31% ～50%为"++";阳性细胞数>50%为"+++"。Ki-67定位于肿瘤细胞核，呈棕黄色。根据阳性肿瘤细胞数的比例分：不着色为(-)，<10%为(+)，10%～50%为(++)，>50%为(+++)；Ki-67>10%为阳性表达。

1.4 统计学方法

将实验结果整理后建立数据库，应用SPSS 17.0软件进行统计分析，计数资料比较采用χ2检验。以P≤0.05为有统计学差异。