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雷公藤多甙诱导SCID小鼠体内HL-60细胞凋亡的研究

2012-01-09唐加明梁国华陈晓昀朱玉峰

实用癌症杂志 2012年3期
关键词:小鼠实验模型

唐加明 梁国华 陈晓昀 朱玉峰

中药雷公藤具有抗炎和免疫调节作用,常用于治疗自身免疫性疾病。文献报道雷公藤还有抗肿瘤作用[1]。我们体外研究显示雷公藤多甙对HL-60细胞有明显地诱导凋亡作用,表明雷公藤多甙在体外实验中具有抗白血病活性[2]。但是,在体外实验中具有抗肿瘤活性的药物在体内抗肿瘤效果并不确定。因此,本研究通过构建重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠人HL-60细胞白血病模型,观察雷公藤多甙在体内对白血病细胞的作用。

1 材料与方法

1.1 细胞系

人急性髓系白血病HL-60细胞株,购自中国科学院上海细胞库。

1.2 实验动物及饲养环境

3~4周龄、雌性、SPF级SCID小鼠30只,购自北京维通利华实验动物技术有限公司。所有小鼠饲养于南方医科大学南方医院实验动物中心,小鼠在层流架内带盖鼠盒中饲养(符合 SPF标准)。

1.3 试剂与仪器

雷公藤多甙为上海医科大学红旗制药厂产品。TUNEL试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供。

1.4 细胞培养

HL-60细胞用含10%小牛血清的RPMI-1640培养液,在37℃、5%CO2、饱和湿度条件下常规培养,每周换液2次。取指数生长期细胞进行移植。

1.5 SCID小鼠人HL-60细胞白血病模型的建立

SCID小鼠移植前未作任何处理。取体外培养的指数生长期的HL-60细胞用于移植,用生理盐水洗涤2次后,每只鼠从静脉接种3×106个细胞。

1.6 实验分组及给药方法

用生理盐水溶解雷公藤多甙。30只小鼠随机分为3组,每组10只:①雷公藤多甙组:于成功接种后第22天开始,每只小鼠腹腔注射雷公藤多甙1 mg/(kg·d),终体积为0.2 ml/d×10天;……

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