朱鑫鑫，刘晓辉，赵征，于景华

（天津科技大学食品工程与生物技术学院，天津 300457）

RP-HPLC法分离和定量测定未变性的乳清蛋白成分

朱鑫鑫，刘晓辉，赵征，于景华

（天津科技大学食品工程与生物技术学院，天津 300457）

建立了一种基于反相高效液相色谱（RP-HPLC）来分离并定量测定脱脂乳、加热脱脂乳及脱脂乳粉中未变性的乳清蛋白的分析方法。采用Venusil ASB-C8色谱柱；流速0.8 mL/min；检测波长215 nm；柱温30℃；流动相A为体积分数0.1%的三氟乙酸水溶液；流动相B为体积分数0.1%的三氟乙酸乙腈溶液；洗脱方式：流动相B开始在38%下等度洗脱2 min，然后在5 min内上升到43%，最后在43%下等度洗脱13 min。此方法在20 min内将4种乳清蛋白组分分离且各蛋白线性关系良好，适合定性和定量检测未变性的乳清蛋白组分。

反相高效液相色谱（RP-HPLC）；乳清蛋白；定量分析

0 引言

乳清蛋白的成分主要有α-乳白蛋白（α-La）、牛血清白蛋白（BSA）和β-乳球蛋白（β-Lg），其变性程度是衡量脱脂乳粉品质好坏的一个重要指标，一般采用乳清蛋白氮指数（WPNI）法来评价，随着研究的深入此方法已不严谨[1]，需要更精确的方法来测定其变性程度。国外学者采用色谱法，有的只分离出了α-La和β-Lg[2-3]，有的分离时间长且没有研究β-Lg的两种遗传变异体[4-5]；国内赵海霞等[6]采用RP-HPLC法仅对乳清蛋白中的α-La和β-Lg进行分离，王浩等[7]用RPHPLC法分离出乳制品中的7中蛋白质，但是样品中没有除去变性的乳清蛋白和酪蛋白，对乳清蛋白变性程度的测量造成困难。本研究为测定脱脂乳及脱脂乳粉中乳清蛋白的变性程度提供了一种有效的方法。……