徐英操，冯志彪

(东北农业大学理学院应用化学系，哈尔滨 150030)

磁性微球固定化Alcalase酶与水解酪蛋白动力学模型的建立

徐英操，冯志彪

(东北农业大学理学院应用化学系，哈尔滨 150030)

采用化学沉积过程，以羟基Fe3O4为核、SiO2为壳进行核壳包被，再以氨基硅烷化试剂和戊二醛为交连试剂实现Alcalase酶的固定化，电镜及红外谱图分析作为表征手段，并将其用于酪蛋白的水解过程，通过双曲线回归模型建立水解全过程动力学模型。

固定化Alcalase；磁性高分子；酪蛋白水解

0 引言

纳米磁性高分子微球具有超顺磁性，作为酶的结合载体，使得固定化酶在外加磁场作用下从水解反应体系中实现有效的磁性聚集、分离和回收再利用。利用固定化蛋白酶水解蛋白制备生物活性肽，能克服游离酶稳定性差、分离回收困难等缺点，因此磁性高分子微球在酶的固定化上得到广泛的应用研究[1-4]。

牛奶中蛋白质的质量分数为3.0%～3.5%，其中约80%为酪蛋白。酪蛋白含有全部蛋白质氨基酸，其中人体必需氨基酸含量丰富，有很高的营养价值，因此在食品工业和其它工业部门都得到了广泛的应用。但是酪蛋白在被消化吸收时在胃中易形成大凝块，影响人体（特别是婴、幼儿）对它的吸收利用。通过酶解酪蛋白的方法制备生物活性肽，既可以促进蛋白的消化吸收，又可以改善酪蛋白的生物活性。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

Alcalase(2.4 L，Novozymes)，N-(β-氨乙基)-γ-氨丙基三甲氧基硅烷（WD51)，酪氨酸，酪蛋白，福林-酚试剂(自配)，水合茚三酮，可见紫外分光光度计(SP-755PC)，恒温振荡仪，冷冻干燥机(FDU-1100)，傅立叶红外，电镜等，其余试剂均为市售分析纯。……