韩 刚，唐丽源，索 炜，刘 莉，康 欣，王彦雪，赵 媛

(河北联合大学 药学院，河北 唐山 063000)

近年来随着人们生活方式的改变，高脂血症在我国发病率呈逐年上升的趋势。研究表明高脂血症与冠心病密切相关［1］。而目前多数降血脂药物均有不良反应，因此在中药中寻找具有降血脂和抗氧化的活性物质备受关注［2］。

大黄酸(Rhein)为中药大黄中的主要活性成分，属蒽醌类化合物，具有保肝、降脂、抗纤维化、降血脂、抗氧化、抗肿瘤、抗炎等多种药理作用［3］。而大黄酸难溶于水，体内生物利用度低。固体分散体技术可用于增加难溶性药物的溶解度和溶出速率，提高生物利用度［4］。本文以聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为载体制备大黄酸固体分散体(RSD)，考察其对高脂血症模型大鼠血脂的影响。

1 材料

大黄酸(纯度＞98%)，南京泽朗医药科技有限公司;PVP，上海化学试剂公司;超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)等试剂盒，南京建成生物工程研究所。

FTIR-8400S红外光谱仪(日本SHIMADZU公司);449C差示扫描量热仪(德国NETZSCH STA公司);TU-1800紫外可见分光光度计(北京普析通用公司)。

SPF级SD大鼠，雌雄各半，体重180～220 g，北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号:SCXK京2009-0004。SPF级环境下饲养，温度20～25℃，相对湿度45% ～70%，自然光照。

2 方法

2.1 RSD的制备

将大黄酸与PVP按质量比1∶4的比例放入烧杯中，加入适量无水乙醇，超声5 min使溶解，转移至旋转蒸发仪中，60℃除去乙醇即得RSD，粉碎，过筛备用［5］。

2.2 RSD的物相鉴定

2.2.1 RSD差热分析 采用差示扫描量热法(DSC)进行样品分析，测试条件为铝坩埚，气氛氮气，流速10 mL/min，升温速率10℃/min。由图1可见，大黄酸在305.2℃有一熔融吸热峰，而其物理混合物在433.9℃有一吸热峰。RSD在439.2℃有一吸热峰，固体分散体中大黄酸305.2℃熔融吸热峰消失。初步推测大黄酸在载体中形成了共沉淀物。可能是由于PVP分子中的羰基与大黄酸分子中的羟基形成氢键，使大黄酸分子以无定形状态进入完全水溶的PVP大分子，从而抑制难溶药物分子的结晶的生成和成长，药物形成过饱和状态，这就大大提高难溶药物的溶解度［6］。

图1 样品的DSC图Fig.1 DSC curves of samples

2.2.2 RSD红外光谱分析 采用溴化钾压片法进行红外光谱分析。由图2可见，大黄酸的羟基峰位在3 320 cm-1，羰基峰位在1 640 cm-1;RSD羟基峰位在3 360～3 320 cm-1为一钝峰，羰基峰位在1 680 cm-1。物理混合物羰基峰位1 640 cm-1，两者比较大黄酸在RSD中的羟基峰和羰基峰均向高波数端移动，由此推测，大黄酸两羟基与载体PVP的C=O之间发生了氢键相互作用，使吸收峰向高波数位移。

图2 大黄酸(A)、大黄酸与PVP(B)、RSD(C)的红外光谱图Fig.2 FTIR spectra of rhein(A)，physical mixture(B)and solid dispersion(C)

2.3 脂肪乳剂的制备

取猪油30 g，胆固醇10 g，加热融化，加吐温80 10 mL，搅拌均匀，得油相。另取胆酸钠2 g和丙硫氧嘧啶0.1 g，加入 1，2-丙二醇10 mL，加热融化，加入水38 mL，搅拌均匀，得水相。将水相倒入油相中，搅拌，即成脂肪乳剂［7］，用时加热融化。

2.4 动物分组与给药

大鼠40只，适应性饲养一周，随机分为5组:正常对照(CON)组、高脂血症模型(MOD)组、大黄酸(RH)组、RSD低剂量(RSDL)组、RSD高剂量(RSDH)组，每组8只。每天上午灌胃前后大鼠禁食禁水1 h，除CON组灌服水10 mL/kg外，其他各组均灌服脂肪乳剂10 mL/kg，连续8周。下午，RH组给予大黄酸25 mg/kg，RSDL组给予RSD 125 mg/kg(相当于大黄酸25 mg/kg)、RSDH组给予RSD 250 mg/kg。

2.5 标本采集

末次给药后，禁食不禁水12 h，大鼠用12%水合氯醛溶液以3 mL/kg腹腔注射麻醉，心脏取血，凝固后，3 000 r/min离心15 min，分离血清;摘取大鼠肝脏左叶，在冷生理盐水中漂洗后，剪取1 g置于匀浆器中，用生理盐水制成10%的组织匀浆，3 000 r/min离心后得肝组织匀浆。测定大鼠血清TG、TC、HDL-C、LDL-C含量，同时测定血清和肝匀浆中MDA含量、SOD和GSH-Px活力。

2.6 统计学分析数据

3 结果

3.1 对大鼠血脂指标的影响

与CON组相比，MOD组大鼠TC、TG、LDL-C值显著升高(P＜0.05)，而HDL-C值则显著降低(P＜0.05)，符合高脂血症的特征。各给药组与MOD组比较，TC、TG值均明显下降(P＜0.05)，RSDL和RSDH组下降的更为明显(P＜0.05);三个给药组血清HDL-C含量与MOD相比均有上升。说明RSD对高脂血症大鼠有降血脂作用。

3.2 对大鼠抗氧化能力指标的影响

与CON组相比，MOD组大鼠血清及肝匀浆MDA含量显著上升(P＜0.01)，GSH-Px、SOD活力显著下降(P＜0.01)，表明在该高脂血症模型状态下，实验大鼠肝脏出现氧化损伤。与MOD组相比，RH、RSDL和RSDH组血清及肝脏MDA含量均降低，GSH-Px和SOD活力升高(P＜0.05)，说明RSD具有显著的抗氧化作用。

表1 大鼠TC、TG、HDL-C、LDL-C浓度(±s，n=8)Tab.1 The contents of TC、TG、HDL-C、LDL-C in rats(±s，n=8)

表1 大鼠TC、TG、HDL-C、LDL-C浓度(±s，n=8)Tab.1 The contents of TC、TG、HDL-C、LDL-C in rats(±s，n=8)

与CON组比较:1P＜0.01;与MOD组比较:2P＜0.05Compare with normal control groups:1P＜0.01;Compare with mode groups:2P＜0.05

组 别 TC/(mmol/L) TG/(mmol/L) HDL-C/(mmol/L) LDL-C/(mmol/L)CON组1.74±0.16 1.87±0.038 1.41±0.25 1.89±0.96 MOD组 2.98±0.151 3.26±0.0671 0.76±0.221 7.28±0.081 RH 组 2.53 ± 0.131，2 2.87 ± 0.0611，2 1.00 ± 0.34 5.89 ± 0.191，2 RSDL 组 2.28 ± 0.0871，2 2.53 ± 0.0571，2 1.18 ± 0.201，2 3.81 ± 1.171，2 RSDH 组 2.03 ± 0.0411，2 2.07 ± 0.0421，2 1.17 ± 0.131，2 2.44 ± 0.161，2

表2 大鼠血清和肝组织中SOD、GSH-Px和MDA水平(±s，n=8)Tab.2 The levels of SOD、GSH-Px and MDA in rats(±s，n=8)

表2 大鼠血清和肝组织中SOD、GSH-Px和MDA水平(±s，n=8)Tab.2 The levels of SOD、GSH-Px and MDA in rats(±s，n=8)

与CON组比较:1P＜0.01;与MOD组比较:2P＜0.05Compare with normal control groups:1P＜0.01;Compare with mode groups:2P＜0.05

组 别血清SOD/(u/mL)GSH-Px/(u/mL)MDA/(nmol/mL)肝组织SOD/(u/mg·pro)GSH-Px/(u/mg·pro)MDA/(nmol/mg·pro)CON组 358.8±3.53 2 553.7±40.33 8.55±0.51 84.11±2.73 1 898.0±51.61 1.96±0.20 MOD组 279.8±3.221 1 619.2±49.661 15.42±0.941 52.89±1.581 1 331.6±90.171 4.36±0.171 RH 组 292.8 ± 6.401 2 141.1 ± 39.951，2 13.48 ± 0.621，2 60.58 ± 1.201，2 1 492.3 ± 48.301，2 3.94 ± 0.131，2 RSDL 组 318.4 ± 5.891，2 2 344.1 ± 21.671，2 12.20 ± 0.241，2 68.32 ± 1.601，2 1 651.6 ± 24.251，2 3.57 ± 0.111，2 RSDH 组 335.6 ± 7.501，2 2 426.3 ± 13.811，2 10.37 ± 0.311，2 74.55 ± 1.741，2 1 777.7 ± 11.561，2 3.13 ± 0.261，2

4 讨论

红外光谱分析和DSC分析表明，大黄酸与PVP形成共沉淀物，大黄酸以无定形状态分散于载体中，从而增加了大黄酸的溶解度和溶出度，提高了大黄酸的生物利用度，使得更多药物进入血液循环［8］。实验结果显示RSD能明显降低大鼠血清中TC、TG和LDL-C的含量，增加HDL-C含量，说明RSD能使大鼠血脂水平降低;RSDL和RSDH组可显著提高大鼠血清中GSH-Px、SOD活力，降低MDA水平，说明RSD具有抗氧化的作用，降低自由基的毒副作用，进而降低脂质过氧化作用对心血管的损伤。RSD对高脂血症模型大鼠有明显的降血脂及抗氧化作用。

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