五味子多糖脱蛋白工艺的研究
2011-11-06汪艳群孟宪军李冬男孙希云
汪艳群,孟宪军,李冬男,孙希云,李 斌
(沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110161)
五味子多糖脱蛋白工艺的研究
汪艳群,孟宪军*,李冬男,孙希云,李 斌
(沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110161)
为建立五味子多糖脱蛋白工艺,对三氯乙酸-正丁醇法、Sevag法、酶法+三氯乙酸-正丁醇、酶法+Sevag处理脱除蛋白进行了研究,并测定处理后多糖液中蛋白质含量。结果表明:酶法+三氯乙酸-正丁醇脱蛋白效果最好,即蛋白酶用量为1%、处理温度为50℃、处理时间为140min、pH为5,酶处理后再用等体积的三氯乙酸-正丁醇溶液重复处理4次,蛋白质含量低于0.005mg/mL。
五味子,多糖,脱蛋白
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
五味子粗多糖 实验室自制,减压干燥备用;无水乙醇、葡萄糖、乙醚、苯酚、浓硫酸、牛血清白蛋白、考马斯亮兰G-250、三氯乙酸、正丁醇、氯仿、木瓜蛋白酶 均为分析纯。
7200型可见分光光度计 尤尼柯(上海)有限公司;电热恒温水浴锅 常州国华电器有限公司; RE-52型旋转蒸发仪 上海博通经贸有限公司; SHZ-IIIB型循环水真空泵 上海华琦科学仪器有限公司;TDL-5000B型离心机 上海安亭科学仪器厂; DZF6050真空干燥箱 上海一恒科技有限公司。
1.2 蛋白质含量的测定
以牛血清蛋白为标准物,用考马斯亮蓝G-50染色法制备蛋白质标准曲线[4-6]。
1.3 多糖含量的测定
用葡萄糖为标准物,使用苯酚-硫酸法[6-9],在恒温25℃,在490nm处测定标准物浓度与吸光度的对应关系,制备标准曲线。
1.4 三氯乙酸-正丁醇法脱蛋白
配制2%浓度粗多糖溶液,使三氯乙酸-正丁醇(V∶V为1∶10)与五味子多糖液等体积混合,振荡10min,静置1h,重复7次[7-8]。……
