花生种子中凝集素的凝集活性及性质研究
2011-11-06吕敬军陆丰升杨庆利张初署于丽娜
孙 杰,吕敬军,陆丰升,杨庆利,*,毕 洁,张初署,于丽娜,朱 凤
(1.山东省花生研究所,山东青岛266100;2.临沂市农业委员会,山东临沂276000; 3.沂水县农业局,山东沂水276400)
花生种子中凝集素的凝集活性及性质研究
孙 杰1,吕敬军2,陆丰升3,杨庆利1,*,毕 洁1,张初署1,于丽娜1,朱 凤1
(1.山东省花生研究所,山东青岛266100;2.临沂市农业委员会,山东临沂276000; 3.沂水县农业局,山东沂水276400)
利用血凝实验及糖抑制实验测定花生种子中凝集素的凝血活性及糖抑制专一性,同时进行热稳定性及pH影响实验。结果显示:花生种子的凝集素粗提液不能凝集人的A、B、O型血细胞,但是可以凝聚唾液酸酶处理后的A、B、O型血细胞。凝集素对红细胞的凝集可被乳糖、蜜二糖、棉籽糖和D-半乳糖四种糖所抑制,在pH为5.0~11.0范围内较稳定,经55℃保温10min后,活性完全消失。在检测的6个不同品种的花生中,河北高油的种子中凝集素活性最强。在花生的生长初期,这种凝集素的存在部位是子叶和根。
花生,凝集素,凝集反应,性质
1 材料与方法
1.1 实验材料
花生种子 花育12号,收于山东省花生研究所实验站;人的A、B、O型血样 青岛市401医院检验科提供;唾液酸酶(Neuraminidase N2876) 购自Sigma公司。
1.2 实验方法
1.2.1 花生种子凝集素粗提液的制备 将花生种子去皮。称取5g去皮的花生种子,用电动研磨器磨碎。称取研磨后的花生粉3g,以1g∶30mL的比例加入石油醚,在30℃条件下,摇床脱脂5h。将脱脂后的液体抽滤,将滤渣放在培养皿中,在通风橱中晾干。晾干后每种样品加入30mL PBS,搅拌后放入4℃冰箱过夜。10000r/min离心20min,弃沉淀。上清液中加入固体硫酸铵至60%饱和度,4℃下搅拌2h,10000r/min离心20min,弃上清。……
