管 骁，农卫良，曹 慧，姚 远

(上海理工大学医疗器械与食品学院，上海 200093)

荧光光度法快速定量大肠杆菌的实验方法研究

管 骁，农卫良，曹 慧，姚 远

(上海理工大学医疗器械与食品学院，上海 200093)

研究比较了菌体渗透处理方式与培养方式对大肠杆菌荧光光度法检测效果的影响，以及考察了培养条件对荧光强度的影响，结果表明仅采用渗透处理方式处理菌液会造成荧光检测值偏小，灵敏度偏低;但经LST－MUG(pH7.0)培养液44℃培养7h后的荧光值能对100.9～106.8cells/mL范围内的大肠杆菌进行定量，结果与国标方法无显著性差异。该法进一步缩短了大肠杆菌的检测时间至8h左右，且重现性良好，适合于大肠杆菌的定量检测。

大肠杆菌，快速检测，荧光光度法

大肠杆菌是国际公认的环境水质监测和食品安全中的重要指示菌，世界各国也普遍将大肠杆菌作为公共卫生、环境保护和食品安全领域中强制性的检测内容［1］。目前大肠杆菌的标准定量检测方法主要以多管发酵法和滤膜法为主，这两种方法均存在操作繁琐、检测周期长等不足，很难适应公共卫生、食品安全事件应急处理与快速反应的需要［2］。基于大肠杆菌细胞内存在特异性β－D－葡糖醛酸糖苷酶(β－D－glucuronidase，GUS)，并能分解4－甲基伞形酮β－D－葡萄糖苷酸(4－Methylumbelliferyl－β－DGlucuronide，MUG)进而产生荧光产物这一原理，国外已成功建立了环境、食品、水体和临床标本中大肠杆菌的MUG快速检测方法，并将其作为检测大肠杆菌的主要方法之一［3－4］。MUG 快速检测法可将传统方法6～10d的检测时间缩短至16～18h以内，并具有特异性强等优点［4］，然而该方法仍存在一些缺陷，如18h左右的检测时间仍偏长，检测限仍有待提高等。……