林社裕，谭湘陵

(南通大学生命科学学院，江苏南通 226007)

当前国内外的骨质疏松症的研究主要集中于骨质疏松症的病因及各种生化检测指标[1～6]。关于骨质疏松症患者血清碱性磷酸酶(ALP)水平目前报道不一，其来源方式亦存在争议。有学者认为系骨质疏松症发生时静止的成骨细胞变为活跃的成骨细胞，释放大量的 ALP入血所致;据此理论治疗后ALP应进一步升高，但事实却与此相反。2009年，我们检测了骨质疏松症大鼠血清 ALP水平，现分析结果并探讨其来源方式。

1 材料与方法

1.1 材料 40只健康 SD雌性大鼠，4个月龄，体质量 250～280 g，由南通大学实验动物中心提供。正置金相显微镜(Leica DM2500);冰冻切片机(Lei ca CM1900);地高辛随机引物标记检测试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司);即用型 SABC免疫组化染色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司);DIG DNA标记试剂盒(上海美季生物技术有限公司);尼龙膜(罗氏公司);Rabbit Anti-Alkaline Phosphatase(武汉博士德生物工程有限公司)。

1.2 模型制备及 ALP检测 将 40只大鼠随机分为模型组和假手术组(对照组)各 20只。模型组腹腔注射戊巴比妥钠麻醉，无菌环境下打开腹腔，摘除卵巢，腹腔分层缝合，肌注青霉素(2万 U/只)。对照组不卵巢摘除，其他操作与模型组相同。术后 3个月两组均颈椎脱臼处死，取股骨去尽肌肉与结缔组织，截取相应骨组织浸入 4%多聚甲醛中固定 3 d，再浸入 4%EDTA溶液中室温脱钙 4周，每周换液1次。脱钙完成后，取骨组织制作冰冻切片(切片厚度 10μm)，贴片于包被多聚赖氨酸的载玻片上行ALP检测。①ALP mRNA:采用原位杂交法。……