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HPLC法测定血浆中辛伐他汀浓度

2011-08-15朱立勤孙秀娟

天津医科大学学报 2011年3期
关键词:辛伐他汀血浆实验

刘 晶 ,朱立勤 ,孙秀娟

(1.天津医科大学研究生院,天津300070;2.天津市第一中心医院药剂科,天津300192;3.天津市民政局老年病医院,天津300110)

辛伐他汀为临床常用治疗高脂血症的药物,对胆固醇有抑制作用,临床主要用于治疗原发性高胆固醇血症[1]。由于辛伐他汀为前体药物,在血中含量较低,因此其血药浓度测定较为困难。本实验采用HPLC法测定,简便灵敏,用于临床上辛伐他汀血药物浓度监测,取得良好效果。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药 岛津LC-10AVP高效液相色谱仪(LC-10AVP输液泵,SPD-10AVP紫外检测器,ANASTAR色谱工作站);AR2140型电子分析天平;色谱分析柱 Kromasil C18(250 mm×4.6 mm 5 μm,天津市琛航科学仪器有限公司);辛伐他汀片(浙江海正药业集团有限公司,批号:091208,20 mg/片);辛伐他汀标准品(中国药品生物制品检定所提供,批号:090402);内标物洛伐他汀标准品(中国药品生物制品检定所提供,批号:090402);甲醇、乙腈均为色谱纯,水为超纯水。血浆样品由天津市第一中心医院提供。

1.2 方法

1.2.1 色谱条件色谱柱:Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(60∶40);紫外检测波长:237 nm;柱温:室温;流速:1.0 mL/min;灵敏度:0.002(AUFS);进样量:20 μL。

1.2.2 辛伐他汀储备液的制备 精密称取辛伐他汀标准品10 mg,加甲醇溶解稀释于50 mL容量瓶中摇匀,再精密吸取此溶液10 mL,加甲醇溶解并稀释于50 mL容量瓶中,制备成40 μg/mL的辛伐他汀储备液。

1.2.3 内标液配制 精密称取内标物洛伐他汀10.0 mg,加乙腈溶解并稀释于100 mL的容量瓶中,摇匀,制成浓度为100 μg/mL的内标储备液。再精密吸取此溶液0.2 mL,加乙腈溶解并稀释于100 mL的容量瓶中,制备成200 ng/mL的内标供试液。

1.2.4 血样处理 取标准血浆溶液0.5 mL,置于旋涡混合器上混匀5 min,用高速离心机(13000 r/min)离心5 min,取出上清液,置于60℃水浴上用氮气吹干,用100 μL流动相复溶后,高速离心,取上清液20 μL待测。……

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