邱惠国 林晖 侯喜琴 赵军 宋秀宇

染色体G显带是研究细胞遗传学的基础，被广泛地用于基础医学、临床医学的研究和染色体病的确诊。整个制片过程繁琐，经历时间较长，任何一个步骤操作不当，均可影响染色体标本制备的最终效果。经过3500多份标本的制备，我们总结了一些经验。

1 染色体G显带玻片的制作

1.1 取血与接种时间 一次性真空采血肝素抗凝管(3 ml规格)，常规消毒肘部皮肤及抗凝管的进针处，抽取静脉血2～3 ml，轻轻摇匀，防止凝固，待接种培养。当天不能培养的标本应及时置于4℃冰箱存放以免影响细胞的活力，一般在采血后1～3 d内可进行培养。在4℃冰箱保存6 d的标本我们也曾培养，且染色体质量也不错。由于存放时间长，有活性的淋巴细胞少，此时应1000 r/min离心10 min后取白细胞层接种。

1.2 细胞培养基与接种全血量 人体血液中的淋巴细胞是一种分化细胞，它的细胞质很少，RNA和蛋白质的6合成速度也很慢，淋巴细胞几乎都是处在G0期或G1期，一般情况下是不分裂的。当在培养基中加入植物血凝素(phytohemagglutinin PHA)时，这种小淋巴细胞受到刺激后转化为淋巴母细胞，并开始进行有丝分裂，进入淋巴细胞生长周期。细胞经过68～76 h的培养，处于分裂期的细胞可达20%以上(我们曾做过此类的实验)，此时加入秋水仙素便可获得大量的中期分裂相细胞。培养基为培养的细胞提供营养，培养基成份中小牛血清和植物血凝素的含量，PH值情况，均可影响染色体分裂指数。我们使用杭州四季青胎牛血清15%，HYCLONE1640液体培养基85%，广州市医药工业研究所PHA 150 ug/ml，严格按无菌操作配制培养基。……