(1辽宁医学院附属第一医院，辽宁锦州 121000;2辽宁医学院组织胚胎学教研室)

研究证实神经干细胞是对中枢神经系统疾病进行细胞替代治疗的重要细胞来源［1］，但由于其取材困难等原因，神经干细胞移植治疗神经疾病受到限制。近几年的研究发现，成肌细胞可以在一定条件下体外分化为神经前体细胞［2］。2009年3月～2010年6月，我们建立大鼠脑梗死模型，将成人成肌细胞来源的神经前体细胞移植于脑内，观察其疗效并探讨其意义。

1 材料与方法

1.1 主要实验材料 取6例行开颅手术患者(20～30岁)的正常颞肌组织(0.5～1.5 g)备用。SD雄性大鼠(辽宁医学院实验动物中心提供)。重组人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、白血病抑制因子(LIF)为GIBCO公司产品，FBS(Hyclone公司)，小鼠抗人Nestin、兔抗人微管相关蛋白2(MAP-2)、兔抗人半乳糖脑苷脂(Galc)、小鼠抗人核抗体(Chemicon公司)，兔抗结蛋白(Desmin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)一抗、异硫氰酸荧光素(FITC)和罗丹明(TRITC)标记的羊抗小鼠和羊抗兔二抗(购于北京中山生物公司)。人MAP-2、Galc和GFAP基因引物由上海博亚生物技术有限公司合成。冷光源为北京泰克公司产品。滤去全部紫外线与红外线，投射出单一白色光束，波长(560±60)nm。

1.2 人成肌细胞的培养、诱导分化及鉴定 参考Baek等的研究方法［2］，用所取的颞肌组织体外培养人成肌细胞，用有限稀释法对获取的细胞进行纯化，选取Desmin染色阳性的单细胞克隆进行扩增培养，并用诱导液进行诱导。人成肌细胞以原培养基培养者为对照。显微镜下观察细胞形态变化。诱导2周后，两组细胞行Nestin(神经干细胞标志物)免疫细胞化学染色鉴定，细胞质呈均匀红色荧光，细胞核蓝染为阳性。……