肖艳英 常业恬 冉 珂 李双凤

研究认为，过多氧自由基生成和氧化还原系统平衡被破坏是心肌缺血再灌注损伤的重要机制，吸入麻醉药预处理的早期心肌保护作用与其增加抗氧化酶的活性有关[1]。谷胱甘肽硫转移酶Mu（gluta⁃thione S-Transferase Mu，GSTM)是抗氧化系统的重要成员。近年来的研究证实GSTM能够抑制心肌兰尼碱受体钙离子释放通道（ryanodine receptor Ca2+release channel，RyR），减少钙离子释放，可能是减少心肌缺血再灌注后钙超载的因素[2-3]。线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道（mito-KATP）在吸入麻醉药预处理产生的心肌保护中发挥重要作用[4]。本研究旨在观察七氟醚延迟预处理对大鼠心肌缺血再灌注的抗氧化作用以及抗氧化酶GSTM的变化。

1 材料与方法

1.1 实验动物 清洁级成年雄性SD大鼠60只，9～10周龄，体质量250～300 g，购于湖南斯莱克景达实验动物有限公司，饲养于我院实验动物中心。按照随机数字法分为5组，每组12只：假手术组（Sham组）开胸但不结扎左冠状动脉；缺血再灌注组（IR组）阻断左冠状动脉前降支30 min，再灌注120 min；七氟醚预处理组（SPC组）心肌缺血前24 h吸入2.5%七氟醚1 h；七氟醚预处理+mito-KATP特异性阻断剂5-羟基癸酸（5-HD）组（SPC+5-HD组），七氟醚预处理前10 min经尾静脉给予mito-KATP特异性阻断剂5-HD（5 mg/kg）；5-HD组，心肌缺血前24 h给予5-HD。

1.2 主要试剂与仪器 大鼠心肌肌钙蛋白I（cTnI）检测试剂盒（上海西唐生物科技有限公司），GSTM多克隆抗体(美国Santa Cruz公司)，5-羟基癸酸(美国Sigma 公司)，七氟醚(美国Abbott公司)，超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽硫转移酶（GST）检测试剂盒（南京建成生物医学工程研究所），七氟醚挥发罐和气体监测仪（美国Datex-Ohmeda公司），Western blot电泳和电转仪设备(美国Bio Rad公司)。……