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东北鹤虱多糖对免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

2011-07-13郭秀英杨凤蕊

天津医科大学学报 2011年3期
关键词:小鼠剂量实验

杨 柳 ,王 萌 ,于 跃 ,郭秀英 ,阎 嘉 ,杨凤蕊 ,孟 林

(1.天津医科大学药理学教研室,天津300070;2.北京市天坛生物制品股份有限公司,北京100024)

东北鹤虱(Lappula Echinata Gilib,LEG)为紫草科植物东北鹤虱的果实,盛产于我国华北、东北等地区。药书记载,其味苦、辛、平,入脾、胃、肝三经,可治疗虫积腹痛[1],民间用其果实或全草水煎治疗各种腹疼、腹泻,尤其对慢性、迁延性腹泻有独到的疗效。已有研究证明其多糖具有抗炎[2]、缓解平滑肌痉挛[3]、调节胃肠水平衡[4]等作用,也有实验表明,其对机体淋巴细胞功能有增强或调节作用[5]。本文将通过观察巨噬细胞(MΦ)体外吞噬、细胞因子IL-1β和TNF-α的分泌,探讨LEGPS-Ⅱ对MΦ参与免疫功能的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药物 东北鹤虱多糖LEGPS-Ⅱ,淡黄色粉末,易溶于水,纯度为38.7%。药物用PBS缓冲液配制成1 mg·mL-1储备液,-20℃冰箱保存,临用前用PBS缓冲液稀释成所需浓度。

1.1.2 试剂 RPMI-1640培养液,北京天润善达生物科技有限公司;超级新生牛血清,美国Gibco公司;注射用环磷酰胺,江苏恒瑞医药股份有限公司,生产批号:05091008;四甲基偶氮唑盐(Methyl thiazolyl tetrazole,MTT),瑞士 Fluka 公司;中性红试剂,中奥天元科技发展有限公司。

1.1.3 实验动物及细胞 近交系清洁级BALB/C及昆明种小鼠,体重(20±0.25)g,4~5 周龄,雌雄不拘,购自中国医学科学院放射医学研究所(批准文号:SCXK津2005-0001)。L929细胞株由天津医科大学药学院惠赠。

1.1.4 仪器 Model 680型酶标仪(Bio-Rad);CK40生物倒置显微镜(Olympus);Forma SeriesⅡ型二氧化碳孵箱(Thermo Electron Corporation)

1.2 方法

1.2.1 LEGPS-Ⅱ对免疫抑制小鼠腹腔MΦ吞噬功能的影响 取昆明种小鼠1只,腹腔注射环磷酰胺,每次给药剂量为25 mg·kg-1,连续给药3 d。第3天给药30 min后,将小鼠脱臼处死。无菌条件下常规方法制备腹腔MΦ悬液。……

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