前房相关免疫偏离中调节性T细胞的变化
2011-07-13张敏敏张晓敏赵少贞
张敏敏,张晓敏,赵少贞
(天津医科大学眼科中心屈光角膜科,天津300384)
前房相关免疫偏离(anterior chamber-associated immune deviation,ACAID)是指在前房种植抗原后所激发的一种独特的偏离式免疫反应,表现为(1)抗原特异性介导迟发型超敏反应(deleyed-type hypersensitivity,DTH)的T细胞和分泌补体固定性抗体反应的抑制;(2)保留了细胞毒T细胞和分泌非补体固定性抗体的B细胞反应;(3)还产生了抑制DTH诱导和表达的调节性T细胞[1]。这一机制对防止眼球受到炎症反应的损害和维持眼内免疫赦免微环境非常重要。Foxp3是转录因子叉头样/翼状螺旋家族(forkhead/winged-helix)的成员[2],其编码基因位于X染色体。实验表明,Foxp3分子是赋予调节性T细胞抑制功能的主要分子,也是在啮齿类和人类CD4+和CD8+调节性T细胞群的标志性特征。Foxp3的异位表达可以将抑制活性转移给某些非调节性T细胞[3]。CD4+CD25+Foxp3+T细胞,CD8+Foxp3+T细胞都是调节性T细胞,在其他免疫反应中均有明显的抑制调节作用。本实验旨在研究CD4+CD25+Foxp3+T细胞、CD8+Foxp3+T细胞在ACAID形成机制中的变化。
1 材料与方法
1.1 主要试剂及动物 C57BL/6小鼠(SPF级)30只,雌性,体重18~20 g,6~8周龄,购自北京大学医学部实验动物部[SCXK(京)2006-0008],饲养在天津医科大学实验动物中心。卵白蛋白(OVA)和完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)购自美国Sigma公司。FITC标记的抗小鼠CD3,PE标记的抗小鼠CD4,PE-Cy7标记的抗小鼠CD25,PE标记的抗小鼠CD8a,APC标记的Foxp3和大鼠IgG1,破膜透化液均购自美国eBioscience公司。小鼠淋巴细胞分离液购自灏洋生物公司。流式分析仪三通阀及螺口注射器购自美国BD公司。工程游标卡尺购自桂林广陆数字测控股份有限公司。
1.2 方法
1.2.1 ACAID的常规诱导[4]将小鼠随机分为3组,ACAID组、阳性对照组和正常对照组,每组各10只。……
