董伟伟，谭 建，王 澎，李 玮

（天津医科大学总医院核医学科，天津300052）

端粒酶是一种核糖核蛋白体，由RNA与蛋白质构成的复合体，是一种特殊的反转录RNA依赖性DNA聚合酶[1]。而端粒酶逆转录酶(hTERT)是其催化亚单位，是端粒酶激活的限速因素。现在研究证实，hTERT启动子可以接到很多治疗基因的表达，比如caspase-8、bax、白喉毒素A、胸苷激酶、rev-caspase-6、FADD和TRAIL，细胞毒性作用被限制在端粒酶表达阳性的肿瘤细胞系内。所以，hTERT启动子在肿瘤的靶向性治疗中是一个很有希望的肿瘤特异性启动子[2-3]。钠碘转运体基因（NIS）是一个膜内糖蛋白，它将碘转运入甲状腺滤泡细胞内是Na+/K+ATP依赖性[4]。转染NIS后非甲状腺来源的恶性肿瘤可以摄取碘，这一点在如前列腺癌、结肠癌[5]、乳腺癌、肝癌[6]、肺癌[7]等肿瘤中得到证实。但是NIS基因介导的基因治疗依然存在着很多问题,例如在非甲状腺细胞中表达NIS基因虽然能引起快速的碘内流，但是也伴随着快速的碘外流，这就限制了其对肿瘤细胞的杀伤作用[8]。Nakamoto等[9]研究发现NIS基因和TPO基因的共转染不仅能提供细胞摄碘率,还能延长碘在细胞内的滞留时间。所以，笔者计划利用hTERT启动子具有肿瘤靶向性表达特点，以及NIS及TPO基因共转染可以保证在放射性碘元素聚集在肿瘤组织内并延长碘的潴留时间的特点，构建相应的重组腺病毒。

1 材料和方法

1.1 材料 人胶质瘤细胞系U251由天津医科大学总医院神经外科实验室提供，人胶质瘤细胞系U87为本实验室自己保存，DMEM高糖型及低糖型培养基和lipofectamine TM 2000及TRIzol购自美国Invitrogen公司，实验所用酶类购自日本TaKaRa公司，荧光分析系统购自美国Promage公司；……