HPLC测定补血益气口服液中淫羊藿苷含量

2011-07-06唐德智

中国民族民间医药 2011年12期

唐德智

广西南宁食品药品检验所，广西南宁 530001

补血益气口服液是由熟地黄、当归、山药、淫羊藿、黄精等九味药材制成的中药制剂，具有补肾气，养血健脾的功效，临床用于治疗肾阳虚，血气不足所致的阳萎早泄，体弱等症。方中淫羊藿为君药，具有补肾阳，强筋骨，祛风湿的功效，现标准中尚无该药相关有效成分含量测定方法［1］。为控制产品质量，保证疗效，本实验采用HPLC法测定补血益气口服液中淫羊藿的含量。实验证明该方法操作简便、准确度高、重现性好，为提高和完善本品质量标准提供实验依据。

1 仪器与试药

LC－2010A HT高效液相色谱仪 (日本岛津公司);KQ－300型超声波清洗器 (江苏昆山市超声仪器有限公司);淫羊藿苷对照品 (中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号:110737－200414);补血益气口服液 (河南永馨制药有限公司市售药品批号:20090326，20090514，20100713，20100827);乙腈为色谱纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Agilent TC－C18(250mm×4.6mm，5μm);流动相:乙腈－水 (24:76);检测波长:270nm;流速:1.0mL·min－1;柱温:30℃;进样量:10μL。

2.2 对照品溶液制备

精密称取淫羊藿苷对照品9.51mg，置50mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得0.1902mg·mL－1对照品贮备溶液，精密量取5mL置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备

精密量取本品10ml，置50ml容量瓶中，加入稀乙醇约25m l，超声处理30min(功率250W，频率33kHz)，取出，放冷，用稀乙醇加至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，微孔滤膜 (O．45μm)滤过，滤液作为供试品溶液。

2.4 阴性供试品溶液的制备

按质量标准中的处方，按制备工艺制成缺淫羊藿的阴性供试品，再按供试品溶液的制备方法制成阴性供试品溶液。

2.5 系统适用性试验

分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，记录色谱图，结果见图1。结果阴性供试品在淫羊藿苷保留时间的相应位置上无淫羊藿苷峰出现，此方法专属性强，阴性对照无干扰。

2.6 线性关系考察

精密吸取“2.2”项下对照品贮备溶液0.5，1.0，3.0，5.0，7.0，9.0mL，分别置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。分取上述不同浓度对照品溶液10μL，依次进样，测定峰面积，以峰面积积分值 (Y)对淫羊藿苷对照品量(μg)进行线性回归，回归方程为:Y=2.76×105x+1.26×103，r=0.9999(n=6)。结果表明，淫羊藿苷在0.095～1.712μg的范围内线性关系良好。

2.7 精密度试验

精密吸取对照品溶液10μL，重复进样6次，测定淫羊藿苷峰面积，结果RSD为0.56%，表明仪器精密度良好。2.8 稳定性试验

取供试品溶液 (批号:20100713)，按上述色谱条件，分别于0，2，4，6，8，10，12 h进样，记录色谱峰面积，RSD为1.68%，表明在12h内供试品溶液稳定性良好。

2.9 重复性试验

取同一批号样品 (批号:20100713)，按供试品溶液的制备方法制备6份供试品溶液，分别按上述色谱条件测定，计算淫羊藿苷含量，其平均含量为0.428mg·mL－1，RSD为1.32%(n=6)。表明方法重复性良好。

2.10 回收率试验

取已知淫羊藿苷含量 (批号:20100713淫羊藿苷含量为0.428mg·mL－1)的样品约5ml共6份，精密称定，分别精密加入一定量的淫羊藿苷对照品，照“2.3”项下方法操作，分别按上述色谱条件测定，计算回收率。结果淫羊藿苷平均加样回收率为99.0%，RSD为1.20%，测定结果见表1。