张金卷，杜 智，王毅军，聂福华，朱争艳

(天津市第三中心医院，天津 300170)

急性肝功能衰竭(acute liver failure,ALF)是一种危重症，病死率高，临床缺乏有效的治疗方法[1]。茵陈蒿汤出自《伤寒论》，由茵陈、栀子、大黄组成，具有舒肝利胆、退黄等作用，已广泛应用于临床各种肝病[2-4]。笔者在以往研究基础上[5.6]，以清热利湿、凉血解毒、活血化瘀、理气开郁立法，组成保肝方剂加味茵陈汤，观察含中药血清对D-氨基半乳糖(D-GalN)诱导的大鼠肝细胞体外损伤模型的作用，以探讨本方剂保肝降酶、促进肝细胞再生的功效。

1 材料与方法

1.1中药制备 加味茵陈汤(茵陈、栀子、大黄、三七、丹参、赤芍、生地、丹皮、白芍、柴胡)，以自动煎药包装机制成汤剂，并制成每1 ml含2 g生药的浓缩剂，置4 ℃ 冰箱储存备用。

1.2含中药血清的制备 Wistar健康成年大鼠20只购自中国医学科学院放射医学研究所(合格证号：0001537)，体质量180～220 g，随机分为两组，每组10 只，制备药物血清组大鼠禁食12 h，灌胃给予中药加味茵陈汤，剂量为每kg体质量30 g生药[5]，2次/d，连续3 d，最后1次给药后1 h内乙醚麻醉，无菌条件下自下腔静脉采血，静置后离心20 min (3 000 r/min，4 ℃) 吸取血清。对照组大鼠给予相同体积生理盐水，以相同方式采取血清作为对照。所取血清均于-80 ℃冰箱储存备用。

1.3含中药血清作用于体外肝细胞损伤模型 与上述实验大鼠同时购进的健康Wistar大鼠10只，雌雄不限，改进Seglen胶原酶(IV型，Sigma)原位灌注法分离获得肝细胞悬液，台盼蓝拒染实验测定细胞活性，以DMEM (GIBCO)培养液调整细胞浓度106/ml，移入24孔培养板(2 ml/孔)于CO2培养箱(FORMA)培养，24 h后更换培养液，各孔以确定剂量(25 mg/L)加入D-GalN[4](购于由重庆医科大学，相对分子质量215.64，批号9902)。……