李广裕，梁季鸿，梁世坤，韦国强，宋卫儒，张 讯，朱春晖

（广西医科大学第一附属医院男性学科，广西 南宁 530021）

近年来，男性不育发病率呈增高趋势，己占到整个不育夫妇比例的20%以上[1]。分析其中的病因，抗精子抗体是免疫性不育的重要原因之一，据WHO 报道，体内存在抗精子抗体而致不育患者占总不育的20%～30%[2]。目前治疗男子免疫性不育主要应用肾上腺糖皮质激素抑制自身免疫反应，从而达到治疗的目的，由于副作用大，效果并不满意[3]。冬虫夏草属肉座菌目麦角菌科虫草属植物，为虫草菌的子座与其寄主蝙蝠蛾幼虫尸体的复合物，俗称虫草，是我国传统的滋补性中药，最早记载于唐代（公元863年）。现代药理学研究证明：虫草不但具有扩张支气管、调节心跳、镇静催眠、雄激素样作用，而且还具有抗炎、抗病毒、抗癌、降血糖、免疫调节等作用[4]。人工培养的虫草菌粉与天然虫草所含的成分基本类同，并已有较多的研究与应用[5]。金水宝胶囊（江西济民可信金水宝制药有限公司，国药准字Z10890003）主要由发酵虫草菌粉组成。主要成分与冬虫夏草大致相同，在临床上我们用金水宝胶囊治疗免疫性不育症，取得了良好效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2010年8月至2010年11月就诊于广西医科大学第一附属医院男性学科，符合纳入标准的不育患者共100例，年龄为25～45岁，平均32.5岁。随机均分对照组（醋酸泼尼松片）、治疗组（金水宝胶囊）共2组。

1.1.1 入选标准 （1）病史资料：婚后未采取任何避孕措施1年以上，有规律、正常性生活，女方未见怀孕或女方曾怀孕而后1年未采取避孕措施而未再怀孕者。（2）实验室检查：精浆AsAb阳性（MAR直接法检测）。（3）知情同意者。

1.1.2 排除标准 （1）既往/目前有明显系统如心、肝、肾及神经系统等原发性疾病或合并症者。（2）合并有遗传性疾病、先天性发育异常、精神病患者。（3）治疗前服用有助生精及提高精子活力的药物者或正在接受其他类似治疗者。（4）有其他免疫性疾患或先天免疫功能低下者。

1.2 测定方法

1.2.1 精液质量检测和分析方法 精液分析根据2010年《WHO人类精液检查和处理实验室手册》（第五版）及2003年卫生部修订的《人类精子库基本标准和技术规范》进行。

1.2.2 精液基本参数检测 采用计算机辅助精子分析（CASA）技术（清华同方公司 CASAS2QH2Ⅲ2XING系统，配MAKLER精子计数板，灰度识别误差用手动系统调整）检测受试者精液。检测指标包括精液量、精子密度、活率、活动力，每份标本随机采样至少400个精子以上。

1.2.3 AsAb检测及判定标准 采用MAR直接法对AsAb进行检测，试剂盒购自安徽安科生物公司，严格按说明书操作步骤进行直接法检测。阳性率R=（粘附于sRBC的活动精子数/计数总活动精子数）×100%。R≤l0% 判为阴性，R＞l0%判为阳性。

1.3 治疗方法

对照组口服醋酸泼尼松片，5 mg，tid，共12周；治疗组口服金水宝胶囊，3粒，tid，共12周。治疗前后定期查血常规、尿常规、肝、肾功能，观察治疗过程中发生的不良反应。

1.4 观察指标及疗效判定标准

治疗结束后不同时间取精液检测精浆AsAb两次均转为阴性为有效，AsAb未完全转为阴性为无效，同时比较组内组间治疗前后精液质量各项参数指标变化。

1.5 统计学分析

数据分析采用SPSS 13.0统计软件完成，样本率比较采用χ2检验，样本均数用“±s”表示，比较采用t检验。

2 结果

2.1 完成情况

对照组治疗后因出现不同程度的痤疮，皮肤感染、恶心、呕吐烧心等不适，体重明显增加，消化道溃疡等共5例自行停药，未完成治疗；治疗组未见明显不良反应，全部完成治疗。治疗前后定期查血常规、尿常规、肝、肾功能未见明显异常。

2.2 AsAb转阴情况

对照组50例，45例完成了治疗，有30例AsAb转阴，有效率为66.7%，治疗组50例全部完成了治疗，有43例AsAb转阴，有效率为88%，治疗组与对照组有效率比较，差异有统计学意义（χ2=6.26，P＜0.05）。结果见表1。

表1 对照组与治疗组AsAb转阴有效率比较（n）

2.3 精液质量各项参数指标变化

治疗前精液量、精子密度、精子活率和A级精子活力，治疗组对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，对照组精子活率和A级精子活力，较治疗前有所提高（P＜0.05），但精液量、精子密度差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗组精液量、精子密度、精子活率和A级精子活力较治疗前均明显提高，且明显优于对照组治疗后（精子活率P＜0.05、余P＜0.01）。结果见表2。

3 讨论

引起男性不育的原因非常复杂，其中免疫性因素已受到普遍重视，免疫性因素是WHO（世界卫生组织）男性不育标准化病因分类诊断之一。MAR法是美国生育学会（AFS）和WHO推荐用于精子抗体检测的首选方法。MAR法[6]能够直观观察到活动精子表面粘附的AsAb的部位及比例，从而反映抗体对生育的影响；另外还可以观察计数活动精子附着的抗体比率是否下降，了解治疗效果，对临床诊断和治疗具有重要指导意义[6，7]。

表2 治疗组和对照组治疗前后精液质量各项参数指标变化（±s）

表2 治疗组和对照组治疗前后精液质量各项参数指标变化（±s）

注：*P＜0.01，△P＜0.05。

组别 n 精液量 精子密度 精子活率 A级精子治疗组 治疗前 50 2.77±1.23 52.58±46.68 44.31±22.25 18.79±12.55治疗后 50 4.96±1.19* 69.83±35.50* 59.32±11.72△ 36.58±10.35*对照组 治疗前 50 2.67±1.13 52.97±46.67 43.34±20.05 18.41±12.85治疗后 45 2.69±1.25 54.97±48.67 53.00±11.89 27.18±10.87

男性免疫性不育是一种自身免疫性疾病[8]。当生殖道出现炎症、损伤、输精管阻塞、睾丸活检及严重睾丸损伤等情况下，血-睾屏障破坏，因成人对精子表面的新生抗原没有耐受性，故免疫系统被激活，从而产生AsAb[9]。我国林宝英等[10]研究结果显示，男性不育患者血清和精浆AsAb阳性组的TNF-а水平明显高于AsAb阴性组的TNF-а水平，AsAb与TNF-а水平呈正相关关系。高正洪[11]研究结果显示在AsAb阳性的不育者中，C3d /C3 的比值显著高于生育组。耿琳琳等[12]研究显示不孕患者体内异常高水平的IFN- ɣ与AsAb 的产生有着密切的关系。故AsAb产生是机体免疫系统被激活，发生免疫反应的结果。而AsAb 是导致男子免疫性不育的主要因素。对于AsAb 阳性免疫性不育患者的治疗，现代医学在口服药上常用肾上腺皮质激素免疫制剂持续疗法，然而肾上腺皮质激素的免疫抑制效应无特异性，既抑制异常的免疫反应，也能抑制正常的免疫反应，因而其虽能明显降低血清和精浆中的AsAb，但对于免疫性不育的总体疗效不高[13]，且疗程长。大剂量的肾上腺皮质激素长期服用，容易产生严重的副反应，如可引起患者免疫力下降，内分泌失调，易感染，引起肾上腺皮质功能亢进症等，诱发胃溃疡和股骨头无菌性坏死等严重并发症，这就限制了肾上腺皮质激素在治疗免疫性不育中的应用。本组研究采用醋酸泼尼松片为对照组，结果因副作用退出治疗，占对照组人数的10%，但转阴有效率仅为66.7%，远低于金水宝胶囊治疗组的88%，而金水宝胶囊无副作用，依从性好，50例患者全部完成治疗。

金水宝胶囊[14]是由青海新鲜虫草中分离出可人工培养的虫草菌—Cs-4菌株（蝙蝠蛾拟青霉），经现代先进的生物技术工艺制成的，具有比天然虫草浓度更高的虫草素、氨基酸、脲嘧啶核苷、腺嘌呤核苷、甘露醇、麦角甾醇，维生素和微量元素等成分。人们已对虫草进行了大量的现代免疫药理学研究，结果表明虫草多糖能引起T细胞、NK细胞、单核细胞和巨噬细胞的活化、增殖，并分泌各种淋巴因子[15]。通过活化免疫因子和细胞，促进细胞因子生成等途径对免疫系统发挥双向调节作用。据魏玮[16]研究提示冬虫夏草可使巨噬细胞免疫活性增强。对外周血淋巴细胞具有双向免疫调节作用，对机体网状内皮系统及腹腔巨噬细胞的吞噬功能具有明显的激活作用，能促进淋巴细胞的转化。Zhou等[17]在体外实验中得出冬虫夏草和虫草素均增加培养的外周血单核细胞产生IL-10、IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-а，同时抑制植物血球凝集素（PHA）诱导的IL-2、IL-4、IL-5、IFN-ɣ和IL-12的产生。Kuo等[18]报道冬虫夏草中的麦角甾醇过氧化物（Cpd 6A ) 可抑制植物血球凝集素（PHA）刺激的人T 细胞的分化与增殖，从而抑制人单核细胞增生。故金水宝胶囊通过对免疫器官、单核巨噬细胞系统、免疫细胞和细胞因子的影响，产生较强的抗炎免疫调节作用而使ASAb转阴，故在治疗免疫性不育患者上，金水宝胶囊疗效确切。本组研究转阴有效率为88%，明显高于对照组（P＜0.05）。另外冬虫夏草能显著刺激雄性荷尔蒙分泌[19]。冬虫夏草的水提液能使摘除睾丸的幼年大鼠精囊重量明显增加，但不影响幼年小鼠子宫重量，表明有雄激素样作用[20]，表明有生精功能。本组研究也得出金水宝胶囊治疗组经过治疗后精液量，精子密度明显增高，治疗前后分别为（2.77±1.23）mL、（52.58±46.68）百万/mL，（4.96±1.19）mL、（69.83±35.50）百万/mL，（P＜0.01）；而对照组无提高。精浆AsAb与精子结合，凝集性AsAb 可导致精子成团凝集，制动性AsAb可使精子尾部“僵硬”，摆动频率及幅度下降，致使精子前向运动减弱，精子活力下降[21]。故随AsAb减少而精子活力相应的提高，本研究经治疗后在精子活率、A级精子活力方面对照组、治疗组均有所提高（P＜0.05），但治疗组明显好于对照组（精子活率P＜0.05，A级精子活力P＜0.01）。

男性生育力与精子的质量和运动能力密切相关。成功的受精和受精潜能在很大程度上不仅依靠精子数目、存活率、形态，更大程度上依靠精子运动能力和质量[21]。在治疗免疫性不育中，金水宝胶囊治疗男性免疫性不育在ASAb转阴率、精子运动能力和质量上均优于醋酸泼尼松片治疗者，且不良反应发生率低，安全可靠，值得临床推广。

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