李祥平

（1.天津药物研究院新药评价有限公司，天津　300301；2.天津农学院，天津　300301）

卵黄和十二烷基硫酸钠添加量对犬精子冻后活率的影响

李祥平1，2

（1.天津药物研究院新药评价有限公司，天津300301；2.天津农学院，天津300301）

本试验以Trjs-葡萄糖稀释液为基础稀释液，就卵黄（20%、25%、30%）和十二烷基硫酸钠（SDS）的添加量（0.725 mg/ml、1.000 mg/ml、1.500 mg/ml）对犬精子冻后活率的影响进行了研究。试验结果表明，（1）20%的卵黄添加量组犬精子的冻后活率最高。25%卵黄添加量组和30%卵黄添加量组比较则没有明显差异（F＜F0.05）。（2）添加SDS与对照组比较，添加SDS组的精子冻后活率都较高。三种SDS添加量中，1.000 mg/ml的添加量效果最好，冻后精子活率极显著（F＞F0.01）或显著（F＞F0.05）高于添加量为0.725 mg/ml和1.500 mg/ml时的冻后精子活率。

犬精子；冷冻；卵黄；十二烷基硫酸钠

1 材料和方法

1.1实验动物

雄性德国牧羊犬一只，6岁，体况中等，身体健康，精液品质较好。

1.2实验器械和试剂

1.2.1实验器械

集精杯、恒温恒湿、培养箱、离心机、显微镜、电子天平、细管精液冷冻仪。

1.2.2实验试剂

Tris、柠檬酸、葡萄糖、丙三醇、十二烷基硫酸钠、卵黄

1.2.3稀释液配方

（1）基础稀释液（Tris-葡萄糖稀释液）

Tris 3.04%，柠檬酸1.7%，葡萄糖1.25%，双蒸水配置。

（2）稀释Ⅰ液（V/V）

试验一：80%基础稀释液 + 20%卵黄；

75%基础稀释液 + 25%卵黄；

70%基础稀释液 + 30%卵黄。

试验二：80%基础稀释液 + 20%卵黄；

80%基础稀释液 + 1.45mg/ml SDS + 20%卵黄；

80%基础稀释液 + 2mg/ml SDS + 20%卵黄；

80%基础稀释液 + 3mg/ml SDS + 20%卵黄；

（3）稀释Ⅱ液（V/V）

90%稀释Ⅰ液+10%甘油。

1.3实验方法

1.3.1公犬保定

双腿夹住颈部保定。

1.3.2人工按摩采精

采精者左手握住阴茎向后推包皮使球体露出，反复按摩球体。当犬的尾部和后肢出现摆动时，右手握住集精杯准备接精，收集精液的中间部分。……