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HPLC法测定莲须中木犀草素的含量

2011-06-18李彦博

实用药物与临床 2011年6期
关键词:实验

李彦博,孙 静

莲须为睡莲科植物莲(Nelumbo nucifera Gaertn.)的干燥雄蕊。味甘、涩,性平,归心、肾经,具有固肾涩精之功效。主要成分为木犀草素、槲皮素、异槲皮苷、山柰素等黄酮类化合物[1]。《中国药典》[2]仅收载显微鉴别,无含量测定标准。本文首次采用HPLC法建立莲须中木犀草素的含量测定方法,为控制莲须药材的质量提供实验依据。

1 仪器与试药

Waters Alliance 2695高效液相色谱仪,Waters二极管阵列检测器(PDA 2996),Waters Empower色谱工作站,UV-2401PC紫外分光光度计(日本岛津),sartorius电子天平。木犀草素对照品购自中国药品生物制品检定所(批号:111520-200504);甲醇为色谱纯;水为纯净水;其余试剂均为分析纯。莲须样品经山东中医药大学石俊英教授鉴定为睡莲科植物莲的干燥雄蕊。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱:Phenomenex-C18(4.6mm ×250mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸溶液(55∶45);检测波长:350 nm;PDA色谱峰光谱采集范围:300~400 nm;流速:1.0mL/min;柱温:30℃;进样量:20μL;理论塔板数按木犀草素峰计算应不低于2500。

2.2 检测波长的选择 取木犀草素对照品适量,用甲醇溶解,照紫外-可见分光光度法,在200~400 nm之间扫描,木犀草素在350 nm处有最大吸收,且峰形良好,故确定检测波长为350 nm。

2.3 供试品溶液色谱峰纯度检查 由于中药材无法制备阴性对照溶液,故选用二极管阵列检测器对供试品溶液色谱峰纯度进行检查。实验结果显示,供试品溶液与对照品溶液在木犀草素保留时间处的光谱图完全一致,表明供试品溶液在木犀草素保留时间处无其他干扰杂质。

2.4 线性关系考察 精密称取木犀草素对照品(五氧化二磷干燥器中减压干燥48 h)10.2 mg,用甲醇溶解并定容至100mL,作为木犀草素对照品储备液(浓度为0.102 mg/mL)。……

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