田 力，祝红杰

哌拉西林钠和他唑巴坦钠组成的复方制剂具有很好的协同抗菌作用，临床用于治疗各种感染性疾病。目前，医药市场中存在多个生产哌拉西林钠他唑巴坦钠的厂家，其产品在症状缓解时间、治愈率等方面均存在一定的差别。本文考察了3个企业生产的注射用哌拉西林钠他唑巴坦钠的主药和杂质含量。

1 材料

1.1 仪器 岛津LC-2010CHT系列高效液相色谱仪(日本岛津公司);色谱工作站465-06043LC solution single verl.22(中文工作站，日本岛津公司);色谱柱Hypersil BDS-C18(250mm×4.6mm，5μm，大连依利特有限公司);十万分之一分析天平(中德合资SARTORIOUS公司);DelTA320PH计(梅特勒-托利上海有限公司)。

1.2 试药 哌拉西林钠标准品(93.5%，中国药品生物制品检定所，批号:130419);他唑巴坦钠标准品(99.1%，中国药品生物制品检定所，批号:130511);注射用哌拉西林钠他唑巴坦钠(4.5 g/支，美国惠氏制药有限公司，批号:0907094、0908048、0908013);注射用哌拉西林钠他唑巴坦钠(1.125 g/支，华北制药集团，批号:20100202、20091006、20100204);注射用哌拉西林钠他唑巴坦钠(2.25 g/支，珠海联邦制药有限公司，批号:00108301、00108305、00108309);甲醇(色谱纯，美国TEDIA公司，批号:1010910);蒸馏水(自制去离子重蒸馏水，经0.22μm微孔滤膜滤过);磷酸(天津市化学试剂六厂，批号:840404);四丁基氢氧化铵水溶液(10%，国药集团化学试剂有限公司，批号:20101111)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱:Hypersil BDS-C18(250mm ×4.6mm，5μm);流动相为甲醇∶B 相溶液(50/50，V/V);流速:0.8mL/min;柱温:30 ℃;检测波长:220 nm;进样量:1μL。

2.2 溶液的配制

2.2.1 流动相中B相溶液的配制［1］取10%四丁基氢氧化铵水溶液14mL，加入800mL水，用磷酸调节pH值至3.5，即得。

2.2.2 标准品储备液的配制 分别精密称定哌拉西林标准品171 mg及他唑巴坦标准品20.2 mg于10mL容量瓶中，以50%(V/V)甲醇的水溶液稀释至刻度，得含16 mg/mL的哌拉西林及2 mg/mL的他唑巴坦标准品储备溶液。

2.3 专属性考察 分别取哌拉西林钠和他唑巴坦钠的标准品储备溶液及两种标准品的混合溶液 进样，进样量1μL，色谱图见图1～图3。

图1 他唑巴坦钠色谱图

图2 哌拉西林钠色谱图

图3 标准品混合溶液色谱图

哌拉西林钠和他唑巴坦钠保留时间分别为9.566min和4.561min，两峰均与杂质峰分离良好，无干扰。

2.4 线性关系考察 分别精密量取标准品储备溶液适量，以50%(V/V)甲醇的水溶液稀释至哌拉西林浓度为 2、4、8、10、12、16 mg/mL 及他唑巴坦浓度为 0.25、0.5、1、1.25、1.5、2 mg/mL 的溶液。分别精密吸取各浓度标准液1μL注入色谱仪，记录峰面积，以峰面积(A)对浓度(C)进行线性回归，得哌拉西林钠及他唑巴坦钠的线性回归方程分别为:A=2062830.8C+19400(r=1.0000);A=1272907.1C-9644.8(r=1.0000)。哌拉西林钠在2～16 mg/mL、他唑巴坦钠在0.25～2 mg/mL范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系。

2.5 精密度考察 精密量取8 mg/mL的哌拉西林及1 mg/mL的他唑巴坦标准品溶液，连续进样5次，记录峰面积，计算RSD值。结果，哌拉西林及他唑巴坦的RSD分别为1.4%、0.2%。

2.6 样品的主药和杂质含量测定 分别取不同厂家各批号的样品，用50%(V/V)甲醇的水溶液稀释成含哌拉西林钠10 mg/mL、他唑巴坦钠1.25 mg/mL的样品溶液。分别精密量取样品溶液1μL注入色谱仪，记录峰面积，计算哌拉西林、他唑巴坦及杂质的含量。哌拉西林和他唑巴坦的含量数据结果见表1，杂质含量数据结果见表2。

表1 样品中主药含量测定结果(mg/mL，n=6)

表2 样品中杂质含量测定结果(mg/mL，n=6)

3 讨论

本实验结果表明，3个厂家(各3批)样品的哌拉西林平均含量分别为标示量的102.8%、96.4%、103.1%，他唑巴坦含量分别为标示量的99.8%、93.3%、98.1%，均符合药典［2］规 定(90%～110%);杂质含量分别为1.72%、2.74%、1.85%，符合药典［2］规定(＜4%)。

实验中为了便于计算，只统计了峰面积在10000以上的杂质峰，保留时间分别为 3.65、4.218、5.414、6.415、7.532min，联邦制药的样品比其他厂家多1个杂质峰，保留时间为3.874min，推测是该厂家制剂的特殊辅料。影响药物疗效的常见因素有主药的多晶型或手性、主药的化学纯度及其稳定性与辅料等。辅料可以通过直接影响药物性质而增加或降低药物的活性，也可以间接地通过辅料自身的性质而影响药效的发挥。本实验仅对主药的化学纯度和杂质的含量进行了考察，3个厂家之间未见明显差别，推测其不是影响临床疗效的因素。其他影响因素尚需进一步研究考察。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)［S］.北京:中国医药科技出版社，2010.

［2］周为民，李健和，彭六保，等.高效液相色谱法测定注射用哌拉西林钠他唑巴坦钠(4∶1)含量及有关物质［J］.中国当代医药，2009，16(9):7-10.