肾透明细胞癌miRNA-34a、Notch1和Hes1的表达及意义
2011-06-14崔苏萍娄远蕾张明飞
杨 阳,崔苏萍,娄远蕾,谢 安,郭 菲,张明飞,汪 泱*
(1南昌大学研究生院医学部,南昌330006;2南昌大学第一附属医院;3南昌大学第一附属医院泌尿外科研究所;4南昌大学第一附属医院烧伤研究所)
研究表明,许多miRNA与肿瘤的发生、发展、转归等有密切关系,在其中发挥癌基因或抑癌基因的作用[1,2]。Notch信号通路是进化上十分保守的信号通路,在细胞分化、增殖、凋亡、黏附、迁移及血管形成等方面都起到了十分重要作用,而异常的Notch信号途径与许多肿瘤的发生有关。已有研究表明,miRNA-34a的靶基因为Notch1。目前Notch信号通路与肾癌的关系不明确,与Notch信号通路相关的miRNA在肾癌中的研究也未见报道。本实验通过观察比较miRNA-34a、Notch1和Hes1在肾透明细胞癌组织与癌旁正常组织的表达差异,探讨其与肾癌发生发展的关系及可能的临床意义。
1 资料与方法
1.1 临床资料 选择2009年9月~2011年1月在南昌大学第一附属医院泌尿外科行肾脏切除术患者的肾癌组织及其癌旁组织(规定距癌组织5cm以上)并保存于液氮中。取术后病理切片证明病理分型为肾透明细胞癌的病理组织共计48份。其中患者男31例、女17例,年龄21~75岁、平均52.5岁。手术方式:肾根治术41例(85.42%),肾部分切除术7例(14.58%)。肿瘤按TNM(2002 AJCC)分期:Ⅰ期38例,Ⅱ期8例,Ⅲ期1例,Ⅳ期1例。按Fuhrman分级:1级24例,2级24例。肿瘤长径1.5~9.5cm,平均 4.43cm。
1.2 方法
1.2.1 RNA的提取 采用液氮研磨法将组织磨成粉末,加入Trizol按试剂说明书提取总RNA。
1.2.2 总RNA纯度和浓度的检测 使用超微量紫外分光光度计测定RNA浓度和纯度,记录OD260值。RNA纯度检测:RNA溶液的OD260/OD280的比值(比值范围1.8~2.1为纯度合格)。……
