乙醛脱氢酶1在非小细胞肺癌中的表达及意义
2011-06-14章建国仇晓军
黄 华,章建国,仇晓军
(南通大学附属医院,江苏南通226001)
乙醛脱氢酶1(ALDH1)是乙醛脱氢酶家族成员之一,在人体的各种组织中广泛分布,是细胞内乙醛氧化的解毒酶,通过氧化视黄醛为视黄酸参与组织的分化和基因的表达。研究表明,ALDH1阳性的乳腺癌患者预后较差,但ALDH1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达尚不明确。本实验应用免疫组化方法研究ALDH1在NSCLC中的表达及其临床意义。现报告如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料 选择南通大学附属医院2008年1月~2009年12月80例NSCLC手术患者的癌组织标本,男55例、女25例,平均年龄59岁。其中鳞癌39例,腺癌41例;低分化癌28例,中分化癌39例,高分化癌13例;TNM分期Ⅰ期40例,Ⅱ期11例,Ⅲ期29例;有淋巴结转移35例,无淋巴结转移45例。另取20例良性病变组织作为对照组。随访时间截至2010年1月,失访4例。
1.2 方法
1.2.1 免疫组化方法检测组织ALDH1含量 采用即用型非生物素免疫组化Elivision TM plus检测试剂盒,用PBS代替一抗作为阴性对照,已知的阳性标本作为阳性对照。石蜡标本切片,脱蜡至水。每张切片加50 μl 3%H2O2,室温孵育 10 min,以阻断内源性过氧化物酶的活性,PBS冲洗;柠檬酸盐修复液微波修复10 min,自然冷却,PBS冲洗;甩去PBS,一次加入鼠抗人单克隆抗体ALDH1、聚合物增强剂、抗鼠/兔聚合物,室温孵育,PBS冲洗。DAB显色,苏木素复染,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。
1.2.2 结果判定 以细胞质中出现棕黄色颗粒为阳性表达。光学显微镜下随机选取10个高倍视野,计数1 000个瘤细胞,计算阳性细胞数百分比。按阳性细胞百分数计分,≤10%为1分,10% ~25%为2分,26% ~50%为3分,>50%为4分;按着色细胞染色强度分,无着色为0分,淡黄色颗粒为1分,棕黄色颗粒为2分,棕褐色颗粒为3分。……
