袁 静，梁 佳，赵 颂，包翠芬*

(1辽宁医学院附属第一医院，辽宁锦州121001;2辽宁医学院科学实验中心)

危重病性肌病(CIM)是危重患者肌无力和肌麻痹引起的急性原发性肌病，以骨骼肌本身或神经—肌肉接头间传递障碍为特征，主要病理变化为肌肉萎缩和坏死［1，2］。目前，CIM 的发病机制尚未明了。研究发现，转化生长因子-β(TGF-β)/Smad通路在调节肌细胞(尤其是骨骼肌细胞)的生长、分化中起重要作用。为探讨TGF-β通路在CIM发生、发展过程中可能的调控机制，2009～2011年，我们进行了相关研究。现报告如下。

1 材料与方法

1．1 动物、仪器及试剂 健康雌性SD大鼠40只，体质量180～210 g，由辽宁医学院实验动物中心提供。全自动免疫组化染色仪(美国DAKO公司);CIAS-1000型细胞图像分析仪(北京大恒公司);Carl Zeiss A1显微镜(德国公司);PowerPac 3000电泳仪、Trans-blot SD半干转膜仪(美国Bio-Rad公司)。

地塞米松(SIGMA公司);兔抗大鼠TGF-β1、Smad3单克隆抗体(博奥森公司);细胞裂解液、蛋白质预染marker(Beyond公司)。

1．2 方法

1．2．1 CIM模型制备及鉴定 将大鼠随机分为正常对照组10只、观察组30只;观察组又分为7、9、11 d三个亚组各10只。观察组用地塞米松5 mg/kg腹腔注射，对照组用等量生理盐水腹腔注射，均每日1次。按照Lennon等提出的评定标准评定肌功能缺损程度。每天观察并记录各组肌功能缺损症状，不符合条件者剔除，并按严格的实验条件进行补充、分组。

1．2．2 组织标本制备 各组均用4%多聚甲醛经腹主动脉灌注固定，然后剖开左侧肢体，分别在垂直于比目鱼肌长轴方向处切取长约1 cm肌肉组织。继续用4%多聚甲醛固定约12 h，然后行梯度乙醇脱水、二甲苯透明、常规石蜡包埋，切片厚度5 μm。……