马小俞 刘哲斌 喻三见 李爽 侯意枫 邵志敏

1.复旦大学附属肿瘤医院乳腺外科，复旦大学上海医学院肿瘤学系，上海 200032；2.复旦大学生物医学研究院，上海 200032

三苯氧胺诱导人乳腺癌MCF-7细胞株耐药及自噬的关系研究

马小俞1,2刘哲斌1喻三见1李爽1侯意枫1邵志敏1

1.复旦大学附属肿瘤医院乳腺外科，复旦大学上海医学院肿瘤学系，上海 200032；2.复旦大学生物医学研究院，上海 200032

背景与目的：三苯氧胺(tamoxifen)作为第一代选择性雌激素受体调节剂(selective estrogen receptor modulator，SERM)被广泛地应用于激素敏感型乳腺癌的内分泌一线治疗。三苯氧胺耐药的发生严重限制了临床治疗，是乳腺癌患者用药面临的重大难题，明确其耐药机制对乳腺癌的治疗有重要临床意义。本研究通过体外诱导人乳腺癌细胞MCF-7三苯氧胺耐药，探讨细胞产生三苯氧胺耐药时自噬水平的变化与MAPK家族蛋白细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase，ERK)蛋白表达量及磷酸化水平的变化。方法：浓度递增筛选法诱导MCF-7细胞耐药，透射电镜观察MCF-7细胞与耐药细胞内的自噬泡数量，CCK8法检测细胞增殖状态，应用Western blot检测LC3Ⅱ、ERK1/2、Phospho-ERK1/2蛋白的表达情况。结果：诱导的三苯氧胺耐药细胞株TR5达到5 μmol/L的耐药浓度。TR5细胞内的自噬泡数量与LC3Ⅱ表达量明显高于MCF-7细胞。ERK蛋白在两种细胞中的表达量差异无统计学意义，但其在TR5中的磷酸化水平比MCF-7细胞高。结论：MCF-7三苯氧胺耐药细胞有较高的自噬水平，MAPK信号通路参与了三苯氧胺耐药。

乳腺癌； 三苯氧胺； MCF-7细胞； 自噬

三苯氧胺(tamoxifen)从20世纪70年代开始广泛地应用于激素敏感型乳腺癌的内分泌一线治疗［1］。……