纺锤体毒物检测新方法的建立和应用
2011-04-13郑璐,王琼
实用医药杂志 2011年8期
郑 璐,王 琼
纺锤体毒物(SP)是一种非遗传毒物,其作用终点并不是遗传物质本身,而是细胞分裂中的纺锤体[1]。因而SP不能被现行的基因突变、染色体畸变试验检出,但SP与一般诱变剂的效应是相同的,最终会引发癌变等严重后果。由此,笔者根据SP的作用终点及其诱变效应,经过反复优化,建立了检测SP的不同实验方法。根据国内外文献报道,选择了偏二甲基肼、雌二醇、利血平、糖精、石棉、秋水仙碱为被检物,它们均有确定的致癌性,但它们的短期致突变试验均未获得满意的结果[2-4]。应用新建立的方法对其诱变活性进行了检测,证明该方法灵敏可靠,从而为防止SP漏检提供了实用、有效的检测手段。现将检测工作报告如下。
1 纺锤体形态损伤的直接观察
首先,借鉴国外先进的经验摸索建立了分化染色技术[5,6]。该技术方法的创新点是用番红和灿烂蓝复合染液将有丝分裂细胞的染色体、细胞质、纺锤丝染成不同颜色,这样在一个完整的细胞中同时显示纺锤体和与之相连的染色体。用这种方法能较容易地分析大量的有丝分裂细胞,使得直接观察纺锤体形态及损伤成为可能。应用该技术方法对所选择的6种被检物进行了检测,随着培养液中浓度的增加,各种形态异常的纺锤体明显增加,呈现良好的剂量效应关系。高染毒量完全破坏了纺锤体结构。
2 诱发非整倍体的检测
纺锤体损伤必然导致整条染色体丢失或增加,即诱发非整倍体。笔者用3种实验方法对其进行了检测。……
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