秦望森 (河南省人民医院检验科,河南 郑州 450000)

乙型肝炎病毒(HBV)血清学标记物(HBV-M)检查仍作为目前临床诊断、治疗和判断HBV感染者病程及传染性的重要指标之一。HBV-M的检测方法有很多种,临床常用的免疫检测方法主要有放射免疫法(RIA)、ELISA。随着科技的发展,一些新的检测技术不断被开发。时间分辨荧光免疫分析法(TRF IA)的研究在国内外广为重视,其在临床检验中的应用日益广泛,特别在免疫分析方面更显示优越性〔1〕。本文探讨 ELISA与TRFIA检测HBV-M的差异并对比分析其临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2007年 2月至2009年 12月本院住院或门诊疑为乙肝的患者,共 216例,其中男 148例,女 68例,年龄 18～58〔平均(30.1±12.1)〕岁。

1.2 方法

1.2.1 试剂及仪器 上海新波生物技术有限公司 HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb和 HBcAb定量检测试剂盒;上海荣盛有限公司 ELISA试剂盒。Anytest 2000型时间分辨荧光免疫分析仪,ELx-800酶标仪。

1.2.2 检测方法 空腹抽取 5 ml静脉血,当日分离血清,分别进行定性和定量检测。TRFIA法测定前用试剂盒内配套乙型肝炎线性参比品制定标准曲线,并由Anytest 2003中文软件得出其各标准曲线皆符合工作要求;ELISA法设立阴阳性对照。然后,应用 TRFIA和 ELISA法分别对 216例样本进行HBV五项血清学标志物定量与定性检测,其操作和结果判读均严格按照说明书和作业指导书的规定进行。

1.3 结果判定 ELISA法:HBsAg、HBsAb、HBeAg均为样本OD值/阴性对照,平均 OD值≥2.1判断为阳性,否则为阴性。HBeAb为冠状病毒(COV)=(阴性对照平均OD值 +阳性对照平均 OD值)/2,样本 OD值≥COV为阳性,＜COV为阴性。HBcAb为 1∶30稀释血清,COV=阳性对照平均 OD值 ×0.5,标本≥COV为阴性,＜COV为阳性。TRFIA定量 HBsAg正常值0～0.5 ng/ml,HBeAg正常值 0～0.03 NCU/ml,HBeAb正常值0～1.5 NCU/ml,HBcAb正常值 0～0.1 NCU/ml,超过正常值视为阳性。……