陶致侃 (沈阳医学院沈洲医院普外科,辽宁 沈阳 110002)

S100A 4是S100家族中研究最多的具有促肿瘤作用的蛋白,通过降低肿瘤细胞间黏附力、促进细胞外基质的降解和重塑、增加肿瘤细胞的运动能力、抑制细胞凋亡和促进细胞异常增殖、促进血管生成等途径,参与细胞的异常增殖、恶变、浸润转移等肿瘤发生、发展中不同阶段的病理过程,进而发挥其促肿瘤作用〔1〕。在多数肿瘤如乳腺癌、结肠癌、肺癌、胰腺癌、胆囊癌、甲状腺癌中,S100A4的表达均高于对应正常组织〔1,2〕。在此,本文采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测转移相关基因 S100A 4在胃癌病灶中的表达,探讨其表达水平与胃癌生物学行为和病情进展的关系。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂 收集本院普外科 2006年 3月至 2009年 5月 45例原发性进展期胃癌切除标本。所有患者术前未经放疗或化疗,病灶均为单发。根据其组织学类型和分化程度,将高分化、中分化腺癌 15例归入分化型,低分化腺癌、黏液腺癌、未分化癌、印戒细胞癌等 30例归入未分化型〔3〕;浸润深度按固有肌层(mp)～浆膜下(ss)和穿透浆膜(se)～侵及周围脏器(si)分为两组;TNM分期参照 1997年 UICC第 5版分期标准〔4〕。

主要试剂:细胞总 RNA提取试剂 TRIzol Reagent(GIBCOBRL公司),逆转录试剂盒 Reverse Transcription System A 3500、TaqDNA合成酶、PCR反应缓冲液(Romega公司),S100A 4及内对照 β-actin的PCR引物(上海生工生物工程有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 手术标本离体后,立即在肿瘤对侧剖开胃壁,在肿瘤生长良好,无坏死区域取瘤组织一块,另于标本距病灶最远处取黏膜组织作为对照。将组织盛于经高压灭菌的Eppendorf管中,置入 -80℃超低温冰箱保存。……