马亮英 蒋磊

小儿腹泻散全方由儿茶、枯矾、半夏、朱砂、五倍子等药味组成，具有涩肠止泻之功效，用于小儿腹泻(水样便)的有效药物。现行收载的检查项下，没有规定具体的微生物限度检查方法，只采用常规方法进行微生物限度检查，其结果不能真实反映其污染的微生物状况［1］。为此笔者对小儿腹泻散按《中国药典》2010年版［2］进行了微生物限度方法学验证，有效提高了微生物污染检出率，从而保证检验结果准确性的检验方法，具体报告如下。

1 仪器与材料

1.1 仪器 HTY-2000A集菌仪(杭州泰林生物技术设备公司)。

1.2 菌种 金黄色葡萄球菌【CMCC(B)26003】;枯草芽胞杆菌【CMCC(B)63501】;大肠埃希菌【CMCC(B)44102】;白色念珠菌【CMCC(F)98001;】;黑曲霉菌【CMCC(F)98003】

1.3 培养基 改良马丁培养基、改良马丁琼脂培养基、营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、MUG培养基、胆盐乳酸增菌液、胆盐乳糖发酵培养基、四硫磺酸钠亮绿培养基、麦康凯琼脂培养基，以上培养基均由北京三药科技开发公司生产

1.4 供试品 小儿腹泻散由新疆医科大学第二附属医院药剂科提供

2 方法与结果

2.1 菌液及供试液制备 取经(32.5±2.5)℃培养18～24 h，金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌肉汤液体培养物1 ml加入9 ml 0.9%氯化钠溶液中，10倍稀释至10-5～10-7，为50～100cfu/ml，备用。另取经(25.5±2.5)℃培养18～24 h，白色念珠菌液体培养物1 ml加入9 ml 0.9%氯化钠溶液中，10倍稀释至10-5，备用。另取经25℃培养一周的黑曲霉菌斜面培养物，加入0.9%氯化钠溶液5 ml，洗下孢子，转移至另一空管中，用标准比浊管比浊，与浊度相当后，取1 ml加入9 ml 0.9%氯化钠溶液中，10倍稀释至10-4，为50～100cfu/ml，备用。

2.2 供试液制备 取供试品制成浓度均为1∶10供试液后，用离心机(500r/min，3 min)离心，取上清液作为供试液。……