罗 俊，刘业兵，陈 坚，宁宜宝

(1.中国兽医药品监察所，北京 100081；2.北京信得威特科技有限公司，北京 100302；3.广东永顺生物制药有限公司，广东 广州 511356)

猪流感(Swine influenza，SI)是由正粘病毒科SI病毒(SIV)引起的一种急性、热性、高度接触性呼吸道传染病。不同日龄、性别和品种的猪均可感染该病[1-2]。目前，已发现的A型SIV有H1N1、H3N2、H9N2等11种血清亚型，我国流行的血清亚型主要有人源H3N2、经典猪源H1N1和类禽源H1N1[3]。

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是由PRRS病毒(PRRSV)引起的一种高度接触性传染病。临床上以母猪妊娠后期的繁殖障碍，新生仔猪的呼吸症状和仔猪的高死亡率为特征[4]。

近年来，SIV和PRRSV在临床上多为混合感染，并且临床症状不典型，仅根据临床症状确诊比较困难。传统的鉴别诊断方法是病原分离鉴定和血清学诊断，但所需时间较长，在混合感染诊断中存在不够灵敏的情况。RT-PCR技术具有快速、敏感和易于操作的特点，被广泛应用于畜禽传染病的检测和鉴别诊断[5]。多重RT-PCR技术是在RT-PCR基础上发展起来的一种检测技术，一次RT-PCR反应能同时检测多种病原，具有简便、快速的鉴别和检测多种病原的优点，能够同时满足多种疾病诊断的要求。为此，本研究进行了SIV和PRRSV的双重RT-PCR检测方法的研究。

1 材料和方法

1.1 病毒株和细胞 H1N1和H3N2型SIV、禽流感(AIV)H9N2分离株、PRRSV VR-2332和BJ分离株、Marc-145细胞均由本实验室保存；H5亚型AIV灭活抗原由哈尔滨兽医研究所提供；猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2型(PCV2)由本研究所猪瘟参考实验室提供；9日龄～10日龄SPF鸡胚购自北京中海公司。……